非小细胞肺癌患者外周血和骨髓中lunx基因表达的

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1、非小细胞肺癌患者外周血和骨髓中LUNX基因表达的【摘要】　　［目的］探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血和骨髓微转移的肺特异性X蛋白（LUNX）基因诊断的临床意义。［方法］应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术，对42例肺癌患者和12例肺良性病变患者的外周血和骨髓中LUNX基因mRNA表达进行检测。［结果］42例肺癌患者有14例在外周血中检测到LUNX基因mRNA的表达，阳性表达率为33.3%，有10例在骨髓中检测到LUNX基因mRNA的表达，阳性表达率为23.8%。LUNXmRNA的表达与CK-19基因mRNA的表达率无显著性差异（P>0.05）

2、。外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及TNM分期均存在密切关系(P<0.05)。［结论］外周血和骨髓LUNX基因mRNA的表达是检测肺癌微转移的一个有价值的指标，为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。【关键词】非小细胞肺癌　微转移　LUNX基因　外周血　骨髓　　Abstract:［Purpose］Toexploretheclinicalsignificanceoflung-specificXprotein(LUNX)genefordiagnosistomicrometastasesinperipheralbloodandbonemarroall-

3、celllungcancerpatients.［Methods］TheLUNXmRNAexpressionarro42casesonarylesion.［Results］ThepositiveratesofLUNXmRNAinperipheralbloodandbonemarrolungcancerpatientsRNAandthatofCK-19mRNA（P>0.05）.ThemicrometastasesinperipheralbloodandbonemarroRNAmightbeavaluablemarkerformicrometastasesinlungc

4、ancerpatients,ayalsoprovideimportantclinicalinformationforprognositicevaluationandpropertreatmentplanning.Keyall-celllungcancer;micrometastases;LUNXgene;peripheralblood;bonemarroicrometastases）是指影像学和常规组织检查不能检测到的循环中的癌细胞以及原发灶以外的微小转移灶。现有的研究结果表明，微转移与患者的预后有一定的相关性，并可早期诊断肿瘤的复发和转移[2~4]。微转移发生在肺癌的

5、早期，说明肺癌是一种全身性疾病。我们选取一种新型的肺癌分子标记物——肺特异性X蛋白（lungspecificXprotein，LUNX）作为研究，以目前广为应用的CK-19标记物为对照，观察其在非小细胞肺癌患者的表达及其预后。同时，对同一个个体的外周血和骨髓同时检测微转移，以期发现临床应用价值。1材料与方法1.1研究对象研究对象为2003年3月至2004年3月我院行肺癌根治术的42例患者，已排除远处转移，手术前均行胸部、肝脏、头部、骨骼的影像学检查。其中男性33例，女性9例，平均年龄64岁（38岁~76岁）。本组患者的肿瘤分期、TNM分期均根据国际抗癌协会1997年第5

6、版的标准[4]。Ⅰ期18例、Ⅱ期10例、Ⅲa期14例。其中病理类型为腺癌10例，鳞癌18例，腺鳞癌2例，细支气管肺泡癌12例。低分化癌15例，中分化癌17例，高分化癌10例。同时设立肺良性病变组：同期接受手术的肺良性病变患者12例，男性7例，女性5例，年龄33岁~62岁。其中肺炎性假瘤4例，肺结核5例，支气管扩张3例。空白对照组：正常健康者外周血，共8例，男性5例，女性3例。1.2实验材料和仪器主要试剂：Trizol、Taq酶（杭州博日科技有限公司），逆转录试剂盒、pGEM-T载体、质粒提取试剂盒(Promega公司)，DNAMarker(Fermentas公司)。主要

7、仪器：实时荧光定量PCR仪（美国ABI公司7700）。引物由上海生物工程有限公司合成，探针购于基康生物技术有限公司。肺癌细胞株A549购于上海中科院细胞生物所，用于制备标准品模板。1.3实验方法1.3.1标本的获取和初步处理所有标本收集过程中严格保持无菌，同时防止上皮细胞污染。在术前1d抽取肺癌组和手术对照组患者以及健康志愿者的外周血约2ml。肺癌组和手术对照组患者在手术中、进胸之前选取手术切口处肋骨抽取约2ml骨髓。以上外周血和骨髓均加入Eppendorf管中并迅速置入液氮中备用。1.3.2RNA的提取和逆转录待测标本及肺癌细胞株A54