丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马chat、ache活性的影响

丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马chat、ache活性的影响

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1、丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马ChAT、AChE活性的影响【摘要】目的:观察丹参(RSM)对幼年大鼠癫痫持续状态(SE)学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。方法:戊四氮(PTZ)诱导大鼠SE,丹参(RSM)进行干预,苯巴比妥钠(PB)作为对照,采用Morris水迷宫观察大鼠空间记忆的改变,应用匀浆比色法检测大鼠海马ChAT、AChE活性。结果:Morris水迷宫测试中PTZ组逃避潜伏期延长(P<0.05),有效搜索策略百分比降低(P<0.01),平台象限游泳时间百分比降低(P<0.0

2、1),海马ChAT、AChE活性降低(P<0.01);RSM组SE后下降的ChAT、AChE活性有所提高,平均潜伏期较PTZ组显著缩短,目标象限停留时间显著高于PTZ组,第13天有效搜索策略百分比高于PTZ组,第23天高于PB组(P<0.05);PB组仅提高AChE活性,PB组平均潜伏期较PTZ组有缩短趋势,但仅第1天有统计学意义,PB组目标象限停留时间显著高于PTZ组。结论:SE可使幼年大鼠学习记忆受损,ChAT、AChE可能参与这一变化的病理生理过程。丹参用药可能通过修复海马胆碱能系统改善幼年大鼠SE学习记忆损伤。【关键词】丹参癫痫持续

3、状态学习记忆胆碱乙酰转移酶乙酰胆碱酯酶水迷宫30%50%的癫痫患儿伴有不同程度的学习记忆减退、注意力分散及社会适应能力下降等认知功能障碍,直接影响患儿生活质量。大量研究证实,癫痫发作尤以癫痫持续状态(statusepilepticus,SE),不仅可引起暂时性脑功能障碍,且可致严重的器质性脑损伤,进而引起学习记忆及行为异常等严重后果。本实验探讨了丹参(radixsalviaemiltiorrhizae,RSM)对幼年SE大鼠学习记忆损伤的改善作用。1材料与方法1.1材料及仪器6周龄健康清洁级雄性SD大鼠(东南大学医学院实验动物中心提供)62只,实验起始

4、体质量(110±20)g,12h光亮/黑暗条件、2225℃环境温度,混合喂养。戊四氮(Sigma公司),丹参注射液(四川升和制药有限公司),苯巴比妥钠注射液(天津金耀氨基酸有限公司),乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)试剂盒(南京建成生物工程研究所),大鼠Morris水迷宫[1](中国药科大学),7530G可见紫外分光光度计(上海分析仪器厂)。1.2SE模型制备及实验分组参照2结果2.1PTZ诱导惊厥的行为特征6只大鼠应用40mg·kg-1、28只50mg·kg-1、16只60mg·kg-1PTZ即开始出现惊厥,主要表现为肌阵挛,伴

5、有前肢阵挛的后肢站立,持续13s。随着PTZ每10min注射1次,进入全面性强直收缩阶段的大鼠表现为失去姿势控制,前、后肢伸肌强烈收缩,并伴有发绀。强直阶段后出现全面性强直阵挛惊厥,大鼠SE持续时间在3090min,7只大鼠应用PTZ60mg·kg-1、34只70mg·kg-1、9只80mg·kg-1发生SE,2只大鼠死于SE。幸存的大鼠自动恢复到基本活动水平。PTZ处理大鼠死亡率为10%。2.2Morris水迷宫实验PTZ组定向航行实验平均潜伏期延长(P<0.01),RSM组平均潜伏期较PTZ组显著缩短(1、2、4、5d)(P<0.01)

6、,PB组平均潜伏期较PTZ组有缩短趋势,但仅第1天有统计学意义(表1)。PTZ组空间探索试验原平台所在象限停留时间较NS组变短(P<0.05),分别为(41.0±8.3)、(57.5±16.3)s;RSM及PB组目标象限停留时间显著高于PTZ组(P<0.05),分别为(59.2±18.9)、(55.6±13.0)s。各组第25天有效搜索策略百分比均高于第1天(P<0.01)。第13天PTZ组有效搜索策略百分比低于NS组,RSM、PB组均高于PTZ组,且第23天RSM组高于PB组(P<0.05)(表2)。表1各组定向航行实验平均潜

7、伏期结果与PTZ组比较,1)P<0.05;与NS组比较,2)P<0.05;与PB组比较,3)P<0.05表2各组有效搜索策略与PTZ组比较,1)P<0.05;与NS组比较,2)P<0.05;与PB组比较,3)P<0.052.3AChE、ChAT活性测定PTZ组AChE、ChAT活性较NS组显著减弱(P<0.01),RSM组AChE、ChAT活性显著高于PTZ组(P<0.01),与NS组无显著差别(P>0.05),PB干预使SE后AChE活性升高(P<0.01),ChAT活性较SE组无明显改善(

8、P>0.05)。见表3。表3AChE、ChAT活性测定结果3讨论SE致学习记忆受损已成为

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