yap和creb 蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

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1、YAP和CREB蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义王君1曲群21.西安交通大学医学院，陕西西安710000；2.西安交通大学二附院妇产科，陕西西安710000[摘要]目的探讨YAP及CREB蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达情况及其意义。方法采用免疫组化检测2008年1月—2013年12月收治的93例患者，观察20例正常卵巢组织、20例良性卵巢肿瘤及53例上皮性卵巢癌组织中YAP、CREB蛋白的表达情况。结果YAP在上皮性卵巢癌组织中阳性表达率为90.57%，而在正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤仅为50%、65%。CREB蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达情况（77

2、.36％）也高于正常卵巢组织（5%），两者相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论YAP、CREB蛋白可能与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关，YAP、CREB在上皮性卵巢癌中的异常表达可为上皮性卵巢癌的诊断、治疗提供实验依据。.jyqk厚连续切片。1.3免疫组织化学实验　（１）兔抗人YAP多克隆均抗体购自美国CST公司，兔抗人CREB多克隆均抗体购自美国CST公司，PBS（0.001M，PH7.4）购自福州迈新生物技术开发有限公司，ＳＰ超敏试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司，按试剂盒说明书步骤进行染色，每次试验均设阴性对照，用磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）代

3、替一抗作为阴性对照，以公司提供的阳性片染色作为阳性对照。（２）实验结果判断：①根据阳性细胞所占百分比评分，阳性细胞≤5％为0分，6％~25％为1分，26％~50％为2分，51％~75％为3分，>75％为4分；②染色强度计分以细胞显色反应程度计分：无着色0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；③将阳性细胞所占的百分比分值和染色强度分值相乘为结果：0分为阴性（-），l~4分为弱阳性（+），5~8分为中度阳性（++），9~12分为强阳性（+++）。以购买的阳性片免疫组化染色结果为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照，采用双盲法由两位病理科医生阅片，取

4、其平均值为最终结果。1.4统计方法　采用ＳＰＳＳ18.0统计软件进行数据分析。χ2检验用于计数资料的比较分析，YAP和CREB的相关分析用Spearman等级分析法。P<0．05为差异有统计学意义。２结果2.1YAP、CREB在不同卵巢组织中的表达在实验中，YAP在正常卵巢组织阳性表达率为50%，YAP在良性上皮卵巢肿瘤的阳性表达率为65％，在恶性上皮性卵巢肿瘤中阳性表达率为90.57%，CREB在正常卵巢组织阳性表达率为5%，在良性上皮卵巢肿瘤的阳性表达率为25％，在恶性上皮性卵巢肿瘤中阳性表达率为77.36%，差异有统计学意义（P<0.05），

5、见表1。2.2YAP、CREB表达与卵巢上皮性癌临床病理学参数关系YAP的阳性表达在正常卵巢组织与良性卵巢上皮性肿瘤之间的差异无统计学意义，P>0.05，YAP在组织学中低分化（G3）组中的阳性表达（97.1%）与高中分化（GI-G2）组的表达（77.8%）差异有统计学意义，P<0.05（χ2=5.217，P=0.040）；但YAP在上皮性卵巢癌阳性表达与患者年龄、临床分期及淋巴转移差异无统计学意义（P>0.05）。在正常卵巢组织与良性卵巢上皮性肿瘤之间CREB的阳性表达，差异无统计学意义（P>0.05）。CREB在组织学中低分化（G3

6、）组中的阳性表达（85.7%）与高中分化（GI-G2）组的表达（61.1%）差异有统计学意义，P<0.05（χ2=9.382，P=0.001）；CREB在上皮性卵巢癌淋巴转移中阳性率（77.4%）较I-Ⅱ期（69.2%）有升高趋势，均差异有统计学意义，P<0.05（χ2=5.568，P=0.015）。另外，CREB的阳性表达与患者年龄、临床分期差异无统计学意义（P>0.05）。2.3YAP和CREB二者表达的相关性分析该研究显示在正常在卵巢上皮细胞中，YAP和CREB阳性表达率分别为50%和50%，在卵巢上皮性癌组织中YAP和CREB阳性表达

7、率分别为90.75%和77.36，经Spearman秩相关分析发现，卵巢上皮性癌组织中的YAP和CREB表达呈显著的正相关（r=0.442，P=0.001＜0.05），差异有统计学意义。见表2。3讨论肿瘤的发生发展是一个多因索、多步骤、多阶段的复杂过程。正常情况下。细胞增生与凋亡之间的动态平衡维持着组织器官正常大小和机体内环境的稳态，而肿瘤的发生发展往往关联于细胞发生异常增殖或凋亡抑制。Hippo信号通路是一种维持增生与凋亡间平衡的信号通路，YAP蛋白是Hippo信号通路中一个起中心作用的蛋白，在细胞正常生长发育过程中，YAP作为一种转录共激活因子通过其PPX

8、Y结构域可与转录因子TEAD家族，P7