赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究

赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究

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1、赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究作者:王磊磊,陈军辉,王虹,殷月芬,王小如,杨东方【摘要】目的确定赤芍和白芍的高效毛细管电泳分析方法,建立赤芍和白芍的高效毛细管电泳法(HPCE)指纹图谱。方法HPCE工作条件:采用未涂层熔融石英毛细管(内径75μm,有效长度50cm),分离电压为25kV,柱温25℃,二极管阵列检测器(DAD)检测波长为220nm,缓冲液为30mmol/L硼砂(pH=9.0)溶液。按此条件对来自不同产地的7种赤芍样品和8种白芍样品进行了分析。结果建立了赤芍和白芍HPCE指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度计算软件,以系统生成的对照指

2、纹图谱为对照模板对不同样品的图谱进行相似度计算。结论该方法简捷、有效,可以用于赤芍和白芍药材的质量控制。【关键词】赤芍;白芍;高效毛细管电泳法;指纹图谱Abstract:ObjectiveTosetupamodernHighPerformanceCapillaryElectrophoresisanalysismethodforseparatinganddetectingRadixpaeoniaeAlbaandRadixpaeoniaeRubraandestablishthEirfingerprints.MethodsSevensamplesofRadixpa

3、eoniaeAlbaandEIghtsamplesofRadixpaeoniaeRubra×75μmi.d.),30mmol/Lborate(pH=9.0)asbuffer,therunvoltageis+25kV,detection,andcolumntemperatureof25℃.ResultsThefingerprintsedandparedbythesoftilarityevaluationsystemforchromatographicfingerprint.ConclusionTheresultsshoethodofHPCEfingerprin

4、tisreliableandaccuratetocontrolthequalityoftedicines.KeyanceCapillaryElectrophoresis;Fingerprint赤芍为毛茛科芍药PaeonialactifloraPall.或川赤芍PaeoniaveitchiiLynch.直接使用的干燥根,其味苦,微寒,归肝经,具有清热凉血、散瘀止痛之功能。白芍为毛莨科芍药PaeonialacttifloraPal1.水煮去皮后使用的干燥根,其味苦、酸,微寒,归肝、脾经,具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗之功能[1]。两种药材中均含有芍药苷、芍药内

5、酯苷、苯甲酰芍药苷等单萜苷类和苯甲酸、没食子酸等酸类成分[2,3],其中总苷类物质为药材的主要活性成分[4],因此2005版《中国药典》规定芍药苷的含量作为赤芍和白芍的质控指标。但是赤芍和白芍的疗效和在临床使用上有很大不同,仅使用单一成分作为指标进行质量控制,不能全面反映药材的有效成分,难以真正全面地控制药材的内在质量。中药指纹图谱是指中药材经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示该中药材及其制剂的各组分群体特性的共有峰的图谱[5]。色谱指纹图谱是通过把复杂的化学成分进行分离,形成高低不同的峰,组成一张色谱图,整个色谱图表达了该样品所含化学成分的多少

6、和量的大小,不仅可用于已知成分的分析,还可以用于未知成分的分析[6]。因此指纹图谱目前被国际上公认为是植物药和中草药质量控制最有效的工具之一[7],如《美国草药典》(AHP)为五味子、甘草等热点植物药确定了比较稳定可靠的TLC、HPLC分析结果和指纹图谱,为该类药材的生产和应用提供依据[8]。近年来,将色谱指纹图谱的方法用于赤芍和白芍研究的相关2.5.4稳定性实验将一个赤芍样品的供试品溶液按照“2.2”项下HPCE工作条件,分别在0,4,6,14,20,24h时进样测定,将一个白芍样品的供试品溶液按相同条件,分别在0,2,4,8,18,24h时进样测定,结果

7、显示供试品溶液中芍药苷在24h内峰面积和保留时间无明显变化,赤芍样品中峰面积和保留时间的RSD值分别为2.66%和0.88%,白芍样品中峰面积和保留时间的RSD值分别为2.93%和0.34%,说明供试品溶液在24h内化学性质稳定。2.6不同药材样品指纹图谱的建立本文检测了经“2.1”项下方法处理的7个赤芍样品和8个白芍样品按“2.2”项下HPCE方法进样分析得到的结果,每个样品平行进样两次,得到色谱图。遵循建立HPCE指纹图谱的技术参数,建立赤芍和白芍样品的指纹图谱。指纹图谱中主要特征峰的相对保留时间或峰面积比值能较全面地反映所含成分的相对关系,体现中药成分

8、的复杂性和相关性,有利于更好地评价、控制中药材及中药

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