rhgcsf对小鼠骨髓间充质干细胞的动员作用

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1、rhGCSF对小鼠骨髓间充质干细胞的动员作用作者：刘岐焕，程范军，陈龙，唐俊明，王家宁，高清平【摘要】为了研究rhGCSF体内应用对小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）的动员作用，将30只小鼠随机分为2组：rhGCSF组和对照组，分别给予皮下注射rhGCSF80μg/（kg·d）和等量生理盐水,连续5天，在最后1次注射后分别于6，12和168小时取小鼠骨髓和外周血，以1×106单个核细胞（MNC）接种于12孔培养板14天，对形成的成纤维细胞集落（CFUF）进行计数，用胰蛋白酶消化后应用流式细胞术测定表面抗原并进行成脂，成骨诱导。结果表明：rhGCSF组骨

2、髓形成的CFUF数均较对照组明显增加(p<0.01)。6小时取材较12小时,168小时取材形成的CFUF数目多(p<0.01)，12小时与168小时CFUF差异无统计学意义。流式细胞术检测骨髓CFUF显示CD34－、CD133－、CD90＋、CD105＋，骨髓CFUF具有成脂、成骨分化的能力。rhGCSF组6小时取材外周血具有类似骨髓的CFUF，出现的频率为（0.50±0.11）×10-6，与对照组比较差异有显著性（p<0.05）。结论：rhGCSF可使小鼠骨髓间充质干细胞增殖加速，但时间短暂，其高峰在rhGCSF应用5天后

3、的6小时内。rhGCSF对小鼠间充质干细胞也有动员能力，但作用较弱。【关键词】骨髓间充质干细胞EffectsofrhGCSFonMobilizationofMouseMesenchymalStemCellsAbstractToevaluatetheeffectsofrhGCSFonmobilizationofmesenchymalstemcells(MSCs)ofmousebonemarroepoint,thirtymicelydividedintorhGCSFtreatmentgroupandcontrolgroup.Themicearroepoin

4、tsof6,12,168hoursafterfinalinjectionofrhGCSForsaline.Bonemarroononuclearcells(BMMNCs)entedberofcolonyformingunitfibroblast(CFUF)etry.ThemultidifferentiationofMSCsinationeasthebonemarroberofCFUFofbonemarroorethanthatincontrolgroup(p<0.01)，thenumberofCFUFinrhGCSFgroupat6hour

5、sorethanthatat12hoursand168hours,respectively(p<0.01).ThereecultureconditionscouldbeobservedaftertherhGCSFinjectionat6hours,butcloningefficiencyobilizehemopoieticstemcellscanbeusedtoinducemouseMSCsinvivoexpansion,inimobilizationeffectonmurineMSCsderivedfrombonemarroarroesenchym

6、alstemcell；CFUFJExpHematol2007;15(4):790-794间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)是目前倍受关注的一类具有多向分化潜能的成体干细胞,被看作是细胞和基因治疗的理想种子细胞。在组织工程中要达到较好的修复重建效果，要求所用的细胞的生物学特性未发生剧烈变化且具有足够的细胞数量。如何获得足够数量的初始MSC是利用MSC进行细胞治疗首先应该解决的问题。众所周知，MSC无论在骨髓还是在外周血中的数量均较造血干细胞（HSC)少。GCSF是目前广泛应用的造血干细胞（HSC）／造血祖细胞（HPC）的动员剂。

7、GCSF在动员HSC/HPC的同时是否也动员了MSC，此问题在目前有争议。本研究旨在通过体内应用GCSF于不同时间培养骨髓和外周血MSC并观察形成的成纤维样细胞集落（CFUF）以探讨GCSF对MSC的动员效果，为临床应用提供实验依据。实验动物及来源健康昆明种2月龄小鼠30只,雄性,体重15-25g,由郧阳医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（鄂）2003-0005；实验动物使用许可证号：SYXK（鄂）2004-0021；实验动物技术上岗证：鄂动资字第421158号。为无特定病原体动物（specificpathogenfreeanimal，SP

8、F）。入选的动物置于恒温、恒湿的安静饲