脑康灵胶囊抗大鼠脑缺血的研究论文

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时间:2018-11-18

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1、脑康灵胶囊抗大鼠脑缺血的研究论文胡雪勇眭玉霞吴芹余丽梅黄燮南孙安盛【摘要】目的观察脑康灵胶囊对脑缺血/再灌注损伤的保护作用,并对其机制作初步探讨。方法采用大鼠大脑中动脉缺血2h/再灌注22h模型,神经病学评分,脑梗塞范围及脑组织水含量变化,观察脑康灵胶囊抗脑缺血/再灌注损伤的效应;通过测定大鼠脑组织中一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS),超氧化物歧化酶(superoxidedisumtase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化以探讨药物作用的机制。结果脑康灵胶囊可降低大鼠脑缺

2、血/再灌注后神经病学评分及梗塞范围,降低脑组织MDA,NOS含量及升高SOD活性。结论脑康灵胶囊对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制NOS活性、抗脂质过氧化、提高SOD活性有关。【关键词】脑康灵胶囊脑缺血/再灌脑缺血保护Abstract:ObjectiveToobservetheprotectiveeffectsofNaokanglingCapsuleoncerebralischemia/reperfusioninjuryinrats.MethodsTheratmodelofmiddlecerebralarteryischem

3、ia2h/reperfusion22he,cerebraleasured.ResultsTheaverageneurologicalscote,cerebralinfractedvolume,cerebralayprotectcerebralischemia/reperfusiondamage,.freelechanismmightberelatedia/reperfusion;Cerebralischemiaprotection目前的研究表明脑缺血损害的机制包括细胞内钙超载.freelbens(Thunb.)Pers的干燥块茎,具有活血

4、祛淤作用;后者为常用中药钩藤UncariarhynchophyllaJackson的茎叶,有活血通络等功效,主要成分有钩藤碱和异钩藤碱。实验采用灌胃给药,观察脑康灵胶囊对动物脑缺血损伤的影响,为临床脑缺血寻找新型有效的治疗药物。1材料与仪器1.1药品与材料脑康灵胶囊由本校药物化学教研室制成,0.3g/粒,主要成分为夏天无及钩藤总碱等。尼莫地平(nimodipine,Nim)系山东新华制药股份公司产品(批号050625),MDA,SOD,NOS,蛋白含量测定试剂盒购于南京建成生物工程公司。1.2仪器BI-2000图象分析系统,成都泰盟公司;

5、JY92-11超声细胞粉碎机,宁波新芝科器研究所。1.3动物SD雄性大鼠,体重230~270g,购于中科院上海实验动物中心(清洁级)。2方法2.1制模及给药参照Nagasave法[1]制模。大鼠苏醒后按Bederdson神经病学评分达3分[2],脑内蛛网膜下腔无出血作为模型成功的标准,选入实验组。已制模大鼠126只,随机分为6组:假手术组,生理盐水组,尼莫地平2mg/kg组,脑康灵20,40,60mg/kg组,每组21只。制模型前灌胃给药1ml/100g体重,2次/d,共5次,最后1次给药后30min制模,制模后12h再给药1次,各组动物

6、于缺血2h/再灌注22h后再进行神经病学评分。2.2脑梗塞范围测定实验各组随机取大鼠7只断头取脑,冠状切分脑组织成5片,TTC染色测量梗塞面积[3]。取出后置10%福尔马林液中避光保存,用BI-2000图象分析系统测出截面上梗塞区域占全部面积的百分比。2.3脑含水量测定每组再随机取7只大鼠断头取脑,正中矢状切分左右大脑后分别称湿重,100℃烤箱烘烤至恒重(即干重),计算脑含水量(%)=(湿重-干重)/湿重×100%。2.4脑组织NOS,SOD,MDA含量测定每组剩余7只大鼠断头取脑,称重,按1∶10加NS,超声细胞粉碎制成10%组织匀浆,

7、冷冻离心20min(0℃,15000r/min),取上清液置-84℃低温冰箱中保存。采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD,硫代巴比妥酸法测定MDA,比色法测定NOS。2.5统计学方法数据的收集和处理实验结果均以±s表示,两小样本均数经方差齐性检验,采用t检验。3结果3.1脑康灵胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤神经病学评分、脑梗塞范围及含水量的影响大鼠脑缺血2h/再灌注22h后,假手术组大鼠神经病学评分均为0分,无脑梗塞;脑康灵胶囊20,40,60mg/kg与生理盐水组比较,均可明显降低脑缺血/再灌后神经病学评分,脑缺血范围和脑水含量且呈剂量依赖性。结果

8、见表1。表1脑康灵胶囊对大鼠神经学评分及脑缺血/再灌脑梗塞区域和脑含水量的影响(略)3.2脑康灵胶囊对大鼠缺血再灌注脑组织中NOS,SOD,MDA的影响与假手术组比较,生理盐水组NOS活性及M

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