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《康脑灵胶囊抗痴呆大鼠自由基损伤的作用机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、康脑灵胶囊抗痴呆大鼠自由基损伤的作用机制研究作者:季旭明,王芳,张桂菊,陆国辉【摘要】目的探讨康脑灵胶囊对痴呆大鼠神经元自由基损伤的保护作用及对caspase-3、Bcl-2表达的影响。方法建立血管性痴呆大鼠模型,中药干预后,用分光光度计检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,荧光分光光度计检测caspase-3表达,流式细胞技术检测Bcl-2的表达。结果康脑灵胶囊明显减少痴呆大鼠MDA含量,提高SOD、NO含量,降低caspase-3表达,增强Bcl-2表达。结论康脑灵胶囊对缺血再灌注痴呆大鼠自由基损伤有明显保护作用,其作用机制与增强B
2、cl-2表达、降低caspase-3表达有关。【关键词】康脑灵胶囊;血管性痴呆;自由基损伤;Bcl-2;caspase-3;大鼠 Abstract:ObjectiveTostudytheprotectionofKangnaolingcapsuletofreeradicalinjuryandinfluenceontheexpressionofcaspase-3andBcl-2inneuronofVDrat.MethodsVDratmodelwasduplicated.UsingspectrophotometrytodetectcontentsofSOD,MDAandNO
3、,spectro-fluorimetertodetecttheexpressionofcaspase-3,spectrophotometricmethodtodetect8theexpressionofBcl-2aftertraditionalChinesemedicineinterference.ResultsKangnaolingcapsulecanmarkedlyreducethecontentsofMDA,raisecontentsofSODandNO,degradetheexpressionofcaspase-3,enhancetheexpressionofB
4、cl-2.ConclusionsKangnaolingcapsulecanmarkedlyprotectVDratfromfreeradicalinjury,whichprobablycorrelatedwithincreasingexpressionofBcl-2,decreasingexpressionofcaspase-3. Keywords:Kangnaolingcapsule;vasculardementia;freeradicalinjury;Bcl-2;caspase-3;rat康脑灵胶囊由川芎、当归、银杏叶,淫羊藿等组成,功能活血化瘀、补肾益智,用于血
5、管性痴呆的治疗[1]。研究表明,其能明显提高痴呆模型动物学习记忆能力,改善与学习记忆相关蛋白乙酰胆碱酯酶、神经生长因子的表达[2]。本研究对其抗缺血再灌注所致痴呆大鼠自由基损伤的保护作用及对凋亡调控蛋白Bcl-2、caspase-3表达的影响进行探讨,现报道如下。 1实验材料 1.1动物8 清洁级纯系Wister雄性大鼠50只,体重(250±50)g,山东医科大学动物实验中心提供,合格证号:D20041021。动物分笼饲养,自由饮水进食,标准饲料喂养,饲料由山东省实验动物中心提供。 1.2药物 康脑灵胶囊,山东中医药大学附属医院制剂室提供,批号980421;西
6、药对照药品为脑复康,天津金世制药有限公司生产,批号20030302。 1.3试剂与仪器 Fluorescein(FITC)Bcl-2,ebioscience,批号11-6992;caspase-3/CCP32FluorometricAssayKit,BioVision,批号K105-25;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供,批号:SOD、MDA为20041028,NO为20041030。FACSCaliber流式细胞仪,美国BD公司;BECKMAN-700全自动生化分析仪,美国贝克曼;RF-540型荧
7、光分光光度计,日本岛津。 2实验方法8 2.1造模、分组与给药 参照改良的四血管夹闭法制备大鼠脑缺血再灌注模型[3]。10%水合氯醛3mL/kg(体重)腹腔麻醉,取仰卧位,颈部正中切口,分离双侧颈总动脉,穿线备用,用微型动脉夹关闭双侧颈总动脉10min,再通10min,反复3次,撤线,缝合。随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、脑复康对照组(C组)及康脑灵高(D组)、低(E组)剂量组。每组10只动物。A、B组予生理盐水灌胃,每日1次;C组给药量为0.28g/kg;D组给药量为2.10g/kg;E组给药量为1.05g/kg。灌胃