《母液的配制》ppt课件

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1、理论知识：培养基：是植物组织培养的物质基础，也是组织培养能否成功的重要因素之一。培养基的主要成分是植物生长发育所必需的各种营养元素。成分：水分（主要成分）无机盐类：大量元素、微量元素、铁盐有机营养成分：维生素、肌醇、氨基酸等植物生长调节剂：细胞分裂素类、生长素类：IAA（吲哚乙酸）、萘乙酸（NAA）培养基类型：MS培养基、B5培养基、N6培养基MS培养基是由Marashige和Skoog为培养烟草组织而设计的，是应用最为广泛的培养基。根据培养材料的种类、有针对性地选择适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合所有情况下的组织培养。培养基制备是植

2、物组织培养的基本工作。培养基含有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅称量麻烦，还容易出现误差，所以配制母液是科学和方便的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。储备液（母液）母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为10倍、20倍、100倍甚至更高倍数的浓缩溶液。按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质对培养材料产生不利影

3、响。实验一MS培养基贮备液（母液）的配制一、实验目的熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液（母液）的配制方法。二、实验原理：配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。以MS培养基为例，所需配制的母液可分为：MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外，还要配制生长物质母液，在不同类型的培养基中使用。三、实验器具与药品电子分析天平、托盘天平、烧杯（50ml,100

4、ml,500ml,1000ml）、量筒（1000ml,100ml,25ml）、容量瓶（1000ml,500ml,100ml）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。四、母液配制流程图按照扩大倍数称量母液分装确定培养基溶解定容贴标签保存于冰箱按顺序混合五、实验方法及步骤1.大量元素母液的配制即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液，一般配成浓度为10倍或20倍的母液。药品名称规定用量mg/L扩大倍数称取量mg母液定容体积mlKNO3190010190001000NH4NO316501016500MgSO4·7H2O370103700

5、KH2PO4170101700CaCl2·2H2O440104400注意：(1)配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才能混合。（2）某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入容1000ml的量瓶中，再加水定容1000ml。（3）CaCl2·2H2O要在最后单独加入（因为氯化钙易与

6、磷酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。（4）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。2.微量元素母液的配制将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大1000倍，用电子天平分别依次称取MnSO4·4H2O22.3g，ZnSO4·7H2O8.6g,H3BO36.2g，KI0.83g，Na2MoO4·2H2O0.25g，CuSO4·5H2O0.025g，CoCl2·6H2O0.025g，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解再依次混合后用容量瓶定容至1000ml，后倒入细口磨砂试剂

7、瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。药品名称规定用量ml/L扩大倍数称取量mg母液定容体积mlMnSO4·4H2O22.31000223001000ZnSO4·7H2O8.610008600H3BO36.210006200KI0.831000830Na2MoO4·2H2O0.251000250CuSO4·5H2O0.025100025CoCl2·6H2O0.0251000252、微量元素母液的配制3.铁盐母液的配制Fe是用量较多的一种微量元素，因铁离子在水溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生沉淀，必须

8、单独配制。只有其螯合物才容易被植物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物母液。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使用起来方便，比较