重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管抑制作用论文

《重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管抑制作用论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管抑制作用论文【摘要】目的探讨重组内皮抑素对碱烧伤诱导兔角膜新生血管（V）的抑制作用。方法新西兰大白兔20只,随机分为两组,每组10只。采用碱烧伤法制备兔V模型后，实验组球结膜下注射重组人内皮抑素0.05mL,对照组球结膜下注射生理盐水0.05mL，均隔日1次，共注射19d。每日裂隙灯显微镜下观察并测量自角膜缘长出的V长度和数量,并摄影，输入计算机经图像分析系统计算V面积。术后19d处死动物，取角膜，CD34染色，显微镜下检测微血管密度（MVD）。结果实验组第7、14、19天V面积及MVD明显少

2、于对照组,差异有显著性(t=4.191～8.003,P0.01)。结论重组内皮抑素可有效抑制V生长.freelodelandrebinanthumanendostatin(0.05mL)entgroupandnormalsaline(0.05mL)etissueincontrolgroup,onceeveryotherdayfor19days.SlitlampmicroscopicobservationberandthelengthofVeruptedfromlimbusofcorneainedandphotographed,

3、ittedtoputerandtheareaofVageanalysis.Theanimalsicrovesselquantity(MVD)icroscopically.ResultsTheexperimentgroupshoallerVareaonday7,14,and19andloethodforthepreventionandtreatmentofthiscondition.［KEYVD）检测碱烧伤后第19天，各组兔子均用空气栓塞法处死,取角膜，石蜡包埋、切片，行苏木精伊红染色及CD34免疫组化染色。CD34染色以血管内

4、皮细胞胞浆及胞膜出现棕黄色颗粒为阳性判断标准。在低倍镜下（100倍）选取角膜血管内皮细胞染色清晰，背景对照良好的5个视野，然后在高倍镜下（400倍）计数所有染色的微血管数，取其平均值作为该切片的MVD。1.5统计学处理采用SPSS13.0统计分析软件进行数据处理,结果以±s表示,数据间比较采用t检验。2结果2.1两组V比较碱烧伤后最初3d,两组结膜均表现为混合充血,烧伤区角膜呈灰白色水肿,第4天两组V开始长入角膜缘内,实验组与对照组V生长情况无明显差异。术后7～14d，对照组V生长最为旺盛,血管粗密,面积为(8.48±1.03)

5、～(23.91±1.82)mm2；实验组V细小、稀疏、生长缓慢,面积为(5.67±0.61)～(17.71±1.65)mm2。两组术后7～14dV生长面积比较，差异有显著性(t=7.443、8.003，P0.01)。见表1。术后15～16d两组血管生长减慢，开始消退，但19d两组V面积比较，差异仍有显著性（t=6.639,P0.01）。表1两组兔角膜碱烧伤后不同时间V面积比较2.2两组MVD比较苏木精伊红染色显示，对照组角膜全基质内可见大量新生血管，管壁薄，管腔大，排列紊乱；实验组浅基质层内可见较少量新生毛细血管，且管腔较小，

6、分布较稀疏。免疫组化染色示，CD34在血管内皮细胞胞浆及胞膜表达，对照组血管多，管腔大，黄染区多，MVD为5.87±1.44；实验组V稀少,管腔细,黄染区少，MVD为3.60±0.94。两组MVD比较，差异有显著性（t=4.191，P0.05）。3讨论内皮抑素是近几年发现的血管生成抑制剂。DHANABAL等4研究显示,内皮抑素能特异性抑制处于增殖状态的新生血管内皮细胞,并伴有诱导凋亡的作用。近年来,国内外学者对内皮抑素的研究主要集中在其对肿瘤的治疗作用。动物实验显示，内皮抑素能够阻断肿瘤细胞的血液供应，使肿瘤消退5,6，用于肿瘤

7、治疗取得了良好的效果。各种病因，如配戴角膜接触镜、角膜创伤、手术、感染等导致的V增生是致盲的重要原因之一，亦是角膜移植术后发生排斥反应的高危因素，但在临床上对于V的治疗至今还是一个极为棘手的问题。V是由角膜缘血管网形成的新生毛细血管逐渐侵入角膜而形成，与血管内皮细胞的增殖密切相关，因此，对V抑制性药物进行研究，对于V的防治、保持角膜透明性、恢复视力有着重要意义。V性疾病将是应用内皮抑素进行治疗的一个良好适应证。本文实验采用碱烧伤法诱导V的形成7，该模型非常逼真地再现了角膜碱烧伤的病理状态，是研究炎症性新生血管发生机制和治疗的重要

8、手段，且此模型操作简便，便于观察和比较新生血管生长状况。我们将重组内皮抑素用于治疗碱烧伤法诱导的角膜V,观察其抑制V的效果。结果显示，重组内皮抑素可明显抑制V的增生。本文观察了不同时间V生长情况,发现碱烧伤后7～14d为血管生长最旺盛时期。内皮抑素能够明显抑制V