丹参酮ⅱa对人胃腺癌细胞sg

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1、丹参酮ⅡA对人胃腺癌细胞SG作者：周晓丽　宋政军　王旭艳【摘要】　　目的体外实验检测丹参酮ⅡA(TanⅡA)对SGC7901人胃腺癌细胞增殖、凋亡的影响，探讨其可能的作用机制。方法体外常规培养SGC7901人胃腺癌细胞用于实验，经TanⅡA作用后，采用MTT比色法检测细胞增殖情况，电镜及流式细胞仪观察胃腺癌细胞凋亡及细胞周期分布。结果TanⅡA对胃腺癌细胞的生长有明显的抑制作用，呈剂量依赖性，与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；TanⅡA作用后胃腺癌细胞表现为凋亡特征性的形态改变；TanⅡA可

2、时间依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡。结论TanⅡA对体外培养的SGC7901人胃腺癌细胞的生长有明显的抑制作用和诱导凋亡的作用，其可能的机制为TanⅡA可将细胞阻滞于G0/G1期，使其不能进入S期。【关键词】丹参酮ⅡA；胃腺癌；凋亡　　TheeffectofTanshinoneⅡAonproliferationandapoptosisof　humangastricadenocarcinomacelllineSGC7901　　ABSTRACT:ObjectiveToobservetheeffectofTanshino

3、neⅡAonproliferationandapoptosisofhumangastricadenocarcinomacelllineSGC7901anditsmechanism.MethodsThehumangastricadenocarcinomacelllineSGC7901orphologyissionelectronmicroscopy.Thecellcycledistributionandtheapoptoticrateetry.SGC7901cellapoptosisatinconcentra

4、tionandfragmentationasationofapoptoticbodiesanner.TanshinoneⅡAcouldinducetheapoptosisintimedependentmanner.ConclusionTanshinoneⅡAhaseffectininhibitingSGC7901cellsandinducingtheapoptosis.TheapoptoticrateandpercentageofcellsinG1phaseincreasedintheSGC7901cell

5、streatedbyTanshinoneⅡA.　　KEYSO)中4℃冷藏备用。RPMI1640培养液购自GIBCO公司；人胃腺癌细胞株(SGC7901)由西安交通大学医学院第一附属医院临床分子实验中心提供，37℃恒温，50%(体积分数)CO2密闭传代培养。　　1.2方法TanⅡA溶解于DMSO。DMSO终浓度为0.02%(体积分数)。用细胞培养液将TanⅡA配制成0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L不同质量浓度的工作液，设0mg/L浓度为对照组。实验将根据MTT结果选取最佳作用浓度的TanII

6、A处理癌细胞。　　1.2.1MTT比色法检测SGC7901细胞的增殖将SGC7901细胞用胰蛋白酶消化后，血细胞计数盘计数，用含10%(体积分数)小牛血清的1640培养液制备为2×105个/mL细胞悬液，接种于96孔细胞培养板内，每孔200μL，生长24h后，随即将其分为6个作用组，每组6复孔。分别加入终浓质量度为0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L的TanⅡA培养液,分别于作用24、48、72h后每孔加入新鲜配置的5g/LMTT储存液20μL，继续孵育4h后，弃去上清液，每孔再加入150μL

7、DMSO溶解细胞内结晶，5-10min后，490nm酶标测定仪测定吸光度(A)值。抑制率=(对照孔A490-实验孔A490)/对照孔A490×100%。　　1.2.2透射电镜观察收集处于对数生长期的SGC7901人胃腺癌细胞，接种于25mL培养瓶内，随机分为两组，分别加入0、10.0mg/LTanⅡA，每组各6瓶细胞。药物处理细胞72h后，用胰蛋白酶消化细胞，置于EP管中，2000r/min，离心10min，弃去上清，收集细胞。加入4℃预冷前固定液20g/L戊二醛固定2h，PBS液清洗，10g/L锇酸固定1-2

8、h，梯度脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色，透射电子显微镜下观察并摄影。　　1.2.3流式细胞术检测细胞周期取培养于25mL培养瓶中的生长良好的SGC7901细胞，分别加入不同浓度TanⅡA干预，使终浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L，设0mg/L浓度为对照组。待药物作用72h后收集细胞，在PI、AnnexinV双染色法下行流式细胞