cpg odn联合hbsag免疫balb-c小鼠和hbv转基因c57bl-6j小鼠

《cpg odn联合hbsag免疫balb-c小鼠和hbv转基因c57bl-6j小鼠》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、CpGODN联合HBsAg免疫BALB/c小鼠和HBV转基因C57BL/6J小鼠【关键词】乙型CpGoligodeoxyribonucleotideice　　【Abstract】AIM：TostudytheeffectsofCpGoligodeoxyribonucleotide(ODN)asadjuvantontheimmuneresponsesinBALB/candHBV-transgenicmiceicemunizedbymultiplesiteintramuscularinjectionotifs.TheHBsAgandantiHBsinserumfro

2、mimmunizedmiceberofIFNsecretingTcellsinedbyELISPOT.RESULTS:InBALB/cmice,themiceimmunizedoralimmuneresponsestoHBsAgthanthoseimmunizedmunizationmunizationesmoreHBs-specificIFNsecretingTcells.InHBVtransgenicmice,antiHBsinserumiceimmunizedinthemiceimmunizedbetmunizationmunizationesmoreH

3、BsspecificIFNsecretingTcells.CONCLUSION:CpGODNcanactasadjuvanttoenhancethehumoralandcellimmuneresponsesinBALB/cmiceimmunizediceandmaybeeapotentialprophylacticandtherapeuticapproach.　　【Keyice,inbredBALB/C;mice，transgenic;immuneresponse　　【摘要】目的：探讨人工合成硫代修饰的含CpG基序的寡脱氧核苷酸(ODN)作为佐剂对HBsAg诱

4、导BALB/c和HBV转基因小鼠产生免疫应答的影响.方法：用人工合成CpGODN与血源HBsAg联合免疫BALB/c和HBV转基因C57BL/6J小鼠，采用ELISA方法观察小鼠血清HBsAg及抗HBs水平，用ELISPOT方法判断CpGODN对HBsAg免疫小鼠脾T淋巴细胞分泌细胞因子的影响.结果：CpGODN联合HBsAg免疫BALB/c小鼠较HBsAg单独注射组同期抗HBs滴度明显提高，尤其在首次免疫后6、8、12L的OT注射器（25号针头）行双后肢多点im，HBsAg10μg，CpGODN50μg，每半月免疫1次，共3次.两种小鼠实验分组相同.①HBs

5、Ag联合CpGODN组12只（研究目的组），注射前将二者充分混匀，②HBsAg组12只（阳性对照组），③CpGODN组8只（阴性对照组）小鼠.分别于免疫前及首次免疫后2，4，6，8，12，16o经眶后静脉丛穿刺采血，每次采血03～05mL，13000r/min，10min，收集上清置-20℃冰箱保存备用.另取同品系BALB/c小鼠和转基因小鼠各24只，分组、接种剂量同上，各8只，每半月免疫1次，共2次，末次免疫后2(临界值为010).小鼠细胞因子分泌T细胞数量用固相酶联免疫斑点实验（ELISPOT）检测，操作按说明书进行，试剂盒购自法国DiaClone公司.　

6、　统计学处理：运用SAS81进行统计分析.抗HBs检测结果及血清平均HBsAg浓度采用重复测量方差分析，P<005表明差异具有显著性.　　2结果　　21BALB/c小鼠产生抗HBs（所有标本25倍稀释）HBsAg单独注射组抗HBs滴度随时间逐渐增高，至首次免疫后16o有3只阳性，几何均数为376，3mo有7只阳性，几何均数为2294，6mo有9只阳性，几何均数为14470(Tab2)，呈逐渐升高趋势，而HBsAg组12只小鼠及寡脱氧核苷酸组8只小鼠在免疫后各时间点抗HBs均阴性.表2转基因小鼠免疫前后血清平均HBsAg浓度(S/N)变化（略）　　23HB

7、V转基因小鼠循环HBsAg（>2为阳性）各组小鼠血清HBsAg免疫前全部阳性，免疫后1，3,6mo各组血清HBsAg均下降,OS组下降更明显，第1时间点与后3个时间点间有统计学差异（F=4545,Ｐ<00001），各个时间点3组之间无统计学差异（F=271,P=00836，Tab3）.　　24BALB/c小鼠细胞因子分泌T细胞我们采用抗IFNγELISPOT方法评价HBsAg、CpGODN单独免疫及二者联合免疫BALB/c小鼠后脾HBsAg特异性T细胞的数量.每条图代表用HBsAg刺激后形成点的脾细胞均值，每孔(2～5)×105细胞.与HBsAg，

8、CPGODN单独免疫比较，联合免疫能使