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1、附子多糖硫酸降解的研究论文.freelaTyphoniipolysaccharidealandultrasoniccondition.MethodsTheorthogonaltesttableL9(34)ize4factorsincludingacidconcentration,.freele,reactiontemperatureandultrasonicpoolecular-alconditionsofdisposingRhizomaTyphoniipolysaccharidealcondi
2、tion，andtheyieldofloolecular-alconditionsolecular-aTyphoniipolysaccharide；orthogonaltest；degradationwithsulfuricacid多糖(polysaccharide)是构成生命的四大基本物质之一,是来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞壁中的天然高分子化合物,其不仅是主要的结构支持物质和主要的能量来源,同时还具有多种生物活性。到目前为止,已有300多种多糖类化合物从天然产物中被提取出来,而且由于它
3、们的独特功能和低毒性,使得其在作为抗肿瘤新药的临床应用中显示出越来越广阔的前景。有研究表明,从附子中提取的多糖具有降血脂、提高免疫力1、抗肿瘤等方面的药理作用。但由于附子多糖提取物中的大分子量多糖存在水溶性较差、不利于生物吸收等特点,而且含量较多,为了提高附子多糖的利用度,笔者对附子多糖的硫酸降解进行了研究。1仪器与试药KQ3200DE超声波清洗仪(江苏省昆山市淀山湖镇),DZKW-S-4电热恒温水浴锅(北京市光明医疗仪器厂),蒸发光散射检测器、Agilent1100HPLC(安捷伦科技有限公司
4、)。白附片(购于北京人卫中药饮片厂,四川产)经水提醇沉,常规脱水、干燥得到的附子粗多糖作为降解原料；其他试剂均为市售分析纯。2试验步骤将附子粗多糖配成浓度为1%的溶液,在正交试验设定的酸浓度、温度、时间、功率下进行降解。在降解完成后,以NaOH溶液中和至中性,除盐后进行分子量及其分布的测定,得出低分子量多糖(分子量低于5000Da)在产物中所占的百分比。分子量及其分布采用高效液相色谱法测定,蒸发光散射检测器检测。2.1常态条件下的硫酸降解以降解后的低分子量多糖含量为指标,选取酸浓度、反应温度和反
5、应时间为因素,采用L9(34)正交表进行试验,因素水平见表1。表1常态条件下硫酸降解多糖因素水平表（略）2.2超声条件下的硫酸降解以降解后低分子量多糖含量为指标,选取超声功率、反应时间、反应温度、酸浓度为因素,采用L9(34)正交表进行试验,因素水平见表2。表2超声条件下硫酸降解多糖因素水平表（略）3结果(见表3、表4)表3常态条件下硫酸降解的正交试验结果（略）由表3的极差R值可知,影响附子多糖降解的因素顺序为B＞C＞A,常态下硫酸降解的最佳组合为B3C3A2,即：硫酸浓度为10%,温度为100
6、℃,反应2h。验证试验表明,在此条件下,产物的低分子量多糖含量为36.17%。表4超声条件下硫酸降解的正交试验结果（略）由表4的极差R值可知,影响附子多糖降解的因素顺序为A＞C＞B＞D,超声条件下硫酸降解附子多糖的最佳组合为A3C1B2D1,即：超声功率为150W,反应时间为1h,反应温度为40℃,硫酸浓度为5%。验证试验表明,在此条件下,产物的低分子量多糖含量为44.63%。4讨论试验结果表明,常态条件下,硫酸降解附子多糖时反应温度为主要影响因素,随着温度的升高,降解产物中低分子量多糖的含量增
7、加。而超声条件下,硫酸降解多糖时超声功率是主要影响因素。由2组正交试验的结果可知,反应温度对产物中低分子量多糖得率的影响截然不同,这可能是由于常态条件下,多糖的硫酸降解主要依靠的是热效应和酸效应,而超声条件下,由于超声所产生的“空穴”效应是使多糖降解的首要因素,而温度的升高使该“空穴”效应弱化。目前,在多糖降解研究中常用的方法有化学降解法、物理降解法和酶降解法等。本试验选用的是常态下的硫酸降解2-3和超声条件下硫酸降解,将单纯的化学降解法与化学、物理降解4相结合的方法进行比较,目的是寻求能获取低
8、分子量多糖得率较高的降解方法,从而提高多糖的利用度。结果表明,当超声降解和硫酸降解结合使用时,可以使产物中的低分子量多糖含量有所提高。【
