hplc法测定中保心宁颗粒中丹参素的含量论文

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1、HPLC法测定中保心宁颗粒中丹参素的含量论文沈利君蒋东海高国芳【摘要】目的：建立保心宁颗粒中丹参素的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定丹参素的含量。色谱柱为AgilentC18柱（250mm×4.6mm，5μm），以水-甲醇-醋酸（88:12:0.05）为流动相，柱温为室温，流速为1ml·min－1。结果：丹参素在2.0～10.0μg进样量的与峰面积有良好的线性关系。r=0.9998（n=5），平均回收率为97.5%（RSD=0.61%）。结论：该测定方法精密度高，重现性好，可用于测定丹参素的含量。【关键词】保心宁颗粒丹参素高效液相色谱Determinationofthecon

2、tentofDanshensuinBaoxinninggranules【Abstract】AIM:toestabolishthemethodtodeterminetheDanshensuinBaoxinninggranules.Methods:HPLCinetheDanshensu.AgilentC18(250mm×4.6mm,.freel)asthechromatogramcolumn.Andethanol:aceticacid(90:10:0.05)asthemobilephase.1.0ml·min－1folntemperaturetemperature.Resultsthe

3、calibrationcurvesofDanshensu.Thecorrelationcoefficientethodple,eccurateandcanbeusedtodeterminetheDanshensuinBaoxinninggranules.【Key×250mm，5um），流动相为水-甲醇-醋酸（88:12:0.05），检测波长：277nm；流速：1.0μL/min；柱温为室温；进样量10μL；理论塔板数以丹参素峰计不低于4000。2.2对照品溶液的制备精密称取丹参素对照品10.0mg置于10ml容量瓶中，用双蒸水定容至刻度，得浓度为1.0mg/ml的对照品储备溶液。2

4、.3供试样品的制备方法考察3取保心宁颗粒适量，研细，精密称取细粉2.0g，用20ml蒸馏水超声30min使之完全溶解，转移至60ml分液漏斗中，用乙酸乙酯进行萃取数次，每次40ml，合并萃取液，蒸干乙酸乙酯，残渣用双蒸水溶解并定容至5ml。为了达到最佳的萃取效果，对乙酸乙酯萃取次数考察，结果乙酸乙酯萃取次数以3次为好。2.4专属性试验精密吸取丹参素对照品溶液、保心宁颗粒样品供试液、阴性空白液各10μl，注入色谱仪中，由色谱图可知，在丹参素对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收，说明此测定方法专属性强，色谱图见图1。2.5线性关系配制一系列不

5、同浓度的丹素对照品溶液，浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg·mL－1，精密吸取上述溶液各10μL进样，以进样量X（μg）对峰面积Y进行线性回归，得到回归方程为Y=316554.7X＋17108，r=0.9998（n=5）。说明丹参素在2.0～10.0μg进样量的与峰面积有良好的线性关系。2.6精密度考察取保心宁颗粒适量，研细，精密称取细粉2.0g，按2.3法下制备供试样品，进样10μl，连续进样6次，记录峰面积，结果丹参素面积的RSD为1.64%（n=6），说明该测定方法精密度较好。2.7稳定性考察取保心宁颗粒适量，研细，精密称取细粉2.0g，按2.3法下制备供试样品

6、，在0h、2h、4h、8h、12h进样10μl，记录色谱峰面积，结果丹参素面积RSD为1.67%（n=5），说明供试样品在12h之内基本稳定。2.8重现性试验取同一批号颗粒剂，按2.3法制备5批样品，分别进样10μl，测得丹参素平均含量为0.387mg·g－1，RSD为1.92%（n=5），说明测定方法重现性较好。2.9加样回收率试验取保心宁颗粒适量，研细，精密称取细粉2.0g，分别加入1.0mg·ml－1的丹参素对照品溶液0.8ml，以下按2.3法制备供试样品，测得丹参素的平均加样回收率为97.5%（n=6），回收率较高，结果见表1。回收率（%）=测出丹参素的量－样品中丹参素的量

7、÷加入丹参素对照品的量×100%表1丹参素加样回收率实验结果（略）2.10含量测定取3批中试保心宁颗粒按2.3法制备供试样品，测定丹参素的含量，结果见表2。表2样品含量测定结果（略）3讨论由于丹参素为酚酸性化合物，极性较大，参考相应文献，决定以不同比例的甲醇-水-酸为基础，探索流动相的最佳组成。试验发现，PH值对峰形的影响较大，当PH值较高时（PH＞5）时，可出现双峰，可能与丹参素在此PH值下呈游离与离子两种状态有关。结果采用水-甲醇-醋酸（88:12:0.05）为流