大孔树脂分离纯化杏香兔耳风总黄酮的工艺研究论文

大孔树脂分离纯化杏香兔耳风总黄酮的工艺研究论文

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时间:2018-11-21

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1、大孔树脂分离纯化杏香兔耳风总黄酮的工艺研究论文邱如意,许军,徐伟,刘燕华【摘要】目的从选取的7种极性不同的大孔树脂中,确定分离纯化杏香兔耳风总黄酮的最佳树脂。方法以杏香兔耳风中总黄酮的静态吸附和动态吸附的各种参数为指标,确定最佳的大孔吸附树脂。结果在实验条件下,综合各种指标,发现AB-8型树脂对杏香兔耳风总黄酮的分离纯化的效果最好。结论大孔吸附树脂法能有效地分离纯化杏香兔耳风中的总黄酮,且AB-8型大孔树脂效果最好。【关键词】杏香兔耳风;黄酮类化合物;大孔吸附树脂Abstract:ObjectiveToselectthebestresinfrom7differentpolarmacr

2、oporousresins,forseparationandpurificationofAinsliaeafragransChampofthetotalflavonoids.MethodsUsingthestaticanddynamicabsorptionparametersoftotalflavonoidsfromAinsliaeofragranschampastheindicators,thebestmacroporousresinined.ResultsAB-8resinhadbesteffectforseparationandpunficationofAinsliaeafra

3、gransChamp.ConclusionMacroporousresincaneffectivelyseparateandpunifythetotalflavonoidsfromAinsliaeafragransChamp,andtypeAB-8macroporousresinisthemosteffective.Keyp;Flavonoids;MacroporousResin杏香兔耳风又名白走马胎、金边兔耳草,为菊科植物铁灯兔耳风AinsliaeamacroclinidioidesHay或杏香兔耳风AinsliaeafragransChamp.的干燥全草1.freell,摇匀,配

4、成0.26mg/ml的标准溶液,备用。精密吸取对照品溶液0,1,.freell,分别置于25ml容量瓶中,分别加70%乙醇至10ml,精密加入5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,静置6min。精密加入10%硝酸铝溶液1ml,摇匀后静置6min,精密加入4%氢氧化钠溶液10ml,再加70%乙醇至刻度,摇匀,放置15min。以第1管作空白在波长510m处用紫外-可见分光光度计测定吸光度,以对照品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,线性范围为10.56~63.36μg/ml,A=10.799C+0.0157,R2=0.9977。2.2.2供试品总黄酮含量的测定取待测样品两份,减压浓缩至干,

5、用甲醇溶解,按“标准曲线的制备”项下标准,测定样品的吸光度值,平行测3次,取平均值,然后用标准曲线方程计算样品中总黄酮的含量。2.3树脂的预处理4取上述市售新鲜的7种大孔树脂,分别用95%酒精浸泡数小时,用大量蒸馏水洗净。以湿法在搅拌下将树脂加入到层析柱中,等树脂沉降后再将水放出,用95%的乙醇3BV/h通过树脂层,至流出液加适量蒸馏水无白色浑浊现象,再用蒸馏水以同样的流速洗至中性,备用。所用树脂的型号及参数见表1。表1吸附树脂的型号及物理参数2.4树脂的选择准确称取处理后的7种大孔树脂湿树脂各1g于具塞磨口三角瓶中,加入杏香兔耳风样品液50ml,25℃恒温振荡24h,振荡频率140

6、r/min。过滤、保留滤液,用蒸馏水洗涤树脂,再将树脂浸泡在70%乙醇中,25℃恒温振荡24h解吸,测定滤液即吸附上清液和解吸液中总黄酮的浓度。2.5静态吸附实验2.5.1吸附等温线的建立准确称取1gAB-8湿树脂于具塞三角瓶中,加一定浓度的料液各50ml,于18,25,32℃下静态吸附,每隔2h取样0.5ml,测定各个时段取样液中总黄酮浓度,绘制吸附等温线。2.5.2吸附动力学曲线的建立准确称取1gAB-8湿树脂于具塞三角瓶中,加一定浓度的料液各50ml,于25℃下静态吸附,每隔2h取样0.5ml,测定各个时段取样液中总黄酮浓度,绘制吸附等温线。2.5.3解吸条件优化5称取8gAB

7、-8树脂于烧杯中,加入一定浓度的料液400ml,静态吸附24h,滤出树脂,过滤后按质量平均分成8份,分别置于8个锥形瓶中,各加入10%,30%,50%,60%,70%,80%,90%,100%的乙醇溶液,静态解吸24h。抽滤,并用各自的洗脱剂冲洗树脂,合并入滤液,得到洗脱液,测定各自的总黄酮含量,并计算解吸量。2.6动态吸附实验2.6.1上样液浓度的考察称取AB-8型树脂50g4份,湿法装入4根2cm×50cm色谱柱中。选择4个浓度药液(1.0,1.8,3

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