大孔树脂分离纯化杏香兔耳风总黄酮的工艺研究

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1、大孔树脂分离纯化杏香兔耳风总黄酮的工艺研究:邱如意,许军,徐伟,刘燕华【摘要】目的从选取的7种极性不同的大孔树脂中,确定分离纯化杏香兔耳风总黄酮的最佳树脂。方法以杏香兔耳风中总黄酮的静态吸附和动态吸附的各种参数为指标,确定最佳的大孔吸附树脂。结果在实验条件下,综合各种指标,发现AB-8型树脂对杏香兔耳风总黄酮的分离纯化的效果最好。结论大孔吸附树脂法能有效地分离纯化杏香兔耳风中的总黄酮,且AB-8型大孔树脂效果最好。【关键词】杏香兔耳风;黄酮类化合物;大孔吸附树脂  Abstract:ObjectiveToselectt

2、hebestresinfrom7differentpolarmacroporousresins,forseparationandpurificationofAinsliaeafragransChampofthetotalflavonoids.MethodsUsingthestaticanddynamicabsorptionparametersoftotalflavonoidsfromAinsliaeofragranschampastheindicators,thebestmacroporousresinined.Res

3、ultsAB-8resinhadbesteffectforseparationandpunficationofAinsliaeafragransChamp.ConclusionMacroporousresincaneffectivelyseparateandpunifythetotalflavonoidsfromAinsliaeafragransChamp,andtypeAB-8macroporousresinisthemosteffective.  Keyp;Flavonoids;MacroporousResin  

4、杏香兔耳风又名白走马胎、金边兔耳草,为菊科植物铁灯兔耳风AinsliaeamacroclinidioidesHay或杏香兔耳风AinsliaeafragransChamp.的干燥全草[1],主要分布于长江流域一带及西南各省。具有清热补虚、凉血止血、利湿解毒等功效,民间全草入药,用于治疗肺结核咳血、感冒咳嗽、咽喉疼痛、跌打损伤、无名肿毒、泌尿疾病、慢性宫颈炎等。杏香兔耳风全草的主要有效成分为黄酮类、有机酸类等化合物[2]。  大孔吸附树脂起源于20世纪70年代,是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂,利用它巨大的表

5、面积进行物理吸附,在实际应用中对一些与其骨架结构相近的分子如芳香族环状化合物具有很强的吸附能力,广泛应用于制药及天然植物中活性成分如皂苷、黄酮、内酯、生物碱等大分子化合物的提取分离[3]。  本实验通过D101型、AB-8型、HPD-100型、HPD-400型、HPD-417型、HPD-450型、HPD-600型7种大孔吸附树脂,对杏香兔耳风中黄酮类化合物的静态和动态吸附性能进行了研究,以期寻找到对杏香兔耳风黄酮类化合物进行精制纯化的一种较合适的方法。  1材料  树脂:D101型、AB-8型、HPD-100型、HPD

6、-400型、HPD-417型、HPD-450型、HPD-600型(沧州宝恩化工有限公司);SartoriusBS110s电子天平;超声波清洗器HN1003(广州华南超声设备厂);UV-2401分光光度计(日本岛津公司);QYC-200全温空气摇床(上海福玛实验设备有限公司)。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号1115382-200301)。  2方法  2.1药液的提取称取一定量杏香兔耳风干燥药材,用70%乙醇作为溶剂,水浴回流提取3~4次,合并提取液,减压浓缩至无醇味,加蒸馏水溶解,即得杏香兔耳风样品液。 

7、 2.2总黄酮含量测定  2.2.1芦丁标准曲线的制备精确称取芦丁对照品0.02640g,用70%乙醇溶解,定容至100ml,摇匀,配成0.26mg/ml的标准溶液,备用。  精密吸取对照品溶液0,1,2,3,4,5,6ml,分别置于25ml容量瓶中,分别加70%乙醇至10ml,精密加入5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,静置6min。精密加入10%硝酸铝溶液1ml,摇匀后静置6min,精密加入4%氢氧化钠溶液10ml,再加70%乙醇至刻度,摇匀,放置15min。以第1管作空白在波长510m处用紫外-可见分光光度计测定吸光度

8、,以对照品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,线性范围为10.56~63.36μg/ml,A=10.799C+0.0157,R2=0.9977。  2.2.2供试品总黄酮含量的测定取待测样品两份,减压浓缩至干,用甲醇溶解,按“标准曲线的制备”项下标准,测定样品的吸光度值,平行测3次,取平均值,然后用标准曲线方程计算样品中总黄

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