瘦素对大鼠血管平滑肌舒缩功能的影响及其机制论文

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1、瘦素对大鼠血管平滑肌舒缩功能的影响及其机制论文【关键词】主动脉【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofleptinonthecontractionandrelaxationofisolatedthoracicaorticsmoothmuscleanditsmechanism.METHODS:Isolatedthoracicaortaeasured.TheactivityofNa+K+ATPaseofvascularsmoothmusclecells(VSMC)easuredbybiochemicalmethod.

2、RESULTS:①Leptinpromotedthevasoconstrictioninducedbynoradrenalineandprolongedtherelaxationdurationofisolatedthoracicaorta.②LeptininhibitedtheactivityofNa+K+ATPase.③C.CONCLUSION:①Theeffectofleptinoncontractionandrelaxationofisolatedvascularsmoothmusclemayberelatedtotheintracellul

3、archangeoftheactivityofNa+K+ATPase.②LeptinaffectstheactivityofNa+K+ATPasebyintracellularPI3Ksignalpath【摘要】目的:观察瘦素对离体血管平滑肌收缩和舒张功能的影响,并探讨其机制.方法:采用离体血管灌流试验,测定血管平滑肌的张力改变;贴块法培养血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC),生化定磷法测定细胞内Na+K+ATPase活性的改变.结果:①瘦素对去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)引起的血管平滑肌收缩

4、有明显促进作用,且明显延长其舒张时间;②瘦素抑制VSMC内Na+K+ATPase活性且有剂量和时间依赖性;③PI3K抑制剂C的上述作用.结论:①瘦素对血管平滑肌舒缩功能的影响与其抑制VSMC内Na+K+ATPase活性,使细胞内[Ca2+]i升高有关;②瘦素对Na+K+ATPase活性的影响是经由受体后PI3K信号通路实现的.【关键词】瘦素;主动脉,胸;Na+K+交换ATP酶;PI3K;钙0引言瘦素是脂肪细胞分泌的由167个氨基酸组成的多肽,不仅调控摄食和能量代谢,还参与代谢紊乱综合征和心血管疾病的发病.研究发现.freelannin)为美国Alex

5、is公司产品,ATPase检测试剂盒由南京建成生物工程研究所生产.XgCl20.4,CaCl20.4,葡萄糖1.0,三羟甲基氨基甲烷盐酸0.07]中,制备成3mm长的动脉环,机械摩擦的方法去除内皮.用银丝将血管环悬挂于37℃的恒温浴槽中,pH7.4改良台式液灌流,溶液中通以950mL/LO2.用张力换能器将血管环的张力变化记录于记录仪上,基础张力定为9.8×10-3N.血管环平衡90min后开始实验.1.2.2离体血管舒缩能力的测定①血管收缩张力的测定:血管环平衡后,以终浓度为1μmol/L的NE诱发其收缩反应,记录1,2,4,.freelin的张力

6、和最大收缩张力.对照组:血管环不用瘦素处理;瘦素处理组:血管环与1μmol/L瘦素溶液共同温育30min后,重复与对照组相同的步骤;②血管舒张速度的测定:血管环平衡后,以1μmol/L的NE收缩至其最大收缩张力,改良台式液洗脱NE,记录1~12min的血管张力对最大收缩张力的百分比,分组与处理同上.1.2.3VSMC的培养按文献[4]方法培养VSMC.取体质量在90~110g的SD大鼠5只,处死后无菌条件下取胸腹主动脉.贴块法行原代VSMC培养.DMEM培养基内含200g/L胎牛血清,培养箱内温度37℃,充以50mL/L的CO2,每周换液2~3次,细

7、胞间完全融合后传代.实验采用第4~6代细胞.1.2.4VSMC内Na+K+ATPase活性测定的实验分组细胞传代至所需数量后,把所有培养瓶内的细胞消化转移至一瓶后计数,调整悬浮细胞的密度为1×109/L,按每管加入1mL细胞悬液转移至5mL离心管,分为4组:①对照组(n=5),不加入任何药物;②不同浓度瘦素处理组,分4个亚组(n=5),分别用终浓度为0.9,9,90,900nmol/L的瘦素和细胞共同温育15min;③C共同温育0,5,15,30,60min,以0min作为对照组.上述干预前,细胞均在不含胎牛血清的DMEM培养基内饥饿2h.1.2.5

8、VSMC内Na+K+ATPase的活性测定上述分组后的细胞悬液以2000r/min离心10min,弃上清液,

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