血小板输注无效-抗体检测与供者选择

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1、血小板输注无效:抗体检测与供者选择作者：周晓华王明元徐惠新【关键词】血小板随着临床输血事业的发展，血小板（platelet，PLT）的使用日益广泛。但是，随着大量使用血小板的情况出现，血小板输注无效成为困扰临床医生的大问题，即反复输血者可能产生的血小板相关抗体及输血小板无效（refractorinesstoplatelettransfusion，RPT）。一般情况下，把监控血小板输注结果常用的公式，即校正计数增值（CCI）和血小板回收率作为判别依据，当输注后1hCCI<7.5和20hCCI<4.5或1h回收率<20%，则认为血小板输注无效。血小板输注无

2、效有非同种免疫因素和同种免疫因素，非同种免疫因素包括血小板质量、发热感染、弥漫性血管内凝血（disseminatedin-travascularcoagulation，DIC）、骨髓移植、脾肿大等因素，另一方面，血小板上由于存在血小板相关抗原，主要是人类白细胞抗原（HLA）Ⅰ类抗原，和血小板特异性抗原即人类血小板抗原（humanplateletantigen，HPA）。目前，HPA被国际正式命名的有22个抗原，其中12个抗原被列入6个遗传系统，分别命名为HPA-1～5和HPA-15。这些抗原产生的同种免疫可导致RPT的发生。研究证实血小板相关抗体中79.9%为HLA抗体

3、，HLA抗体与血小板抗体共存占17.6%，血小板特异性抗体占2.7%［1］。国外对血小板输注无效的预防、处理、抗体实验评估及应用有相当多的讨论［2～4］。血小板相关抗体常出现在血小板输注6次以上的患者中，有报道称反复大量的输注血小板可导致50%左右患者产生同种免疫抗体，相当于红细胞同种抗体产生频率的几十倍。血小板相关抗体引起的新生儿免疫性血小板减少症（neonatalalloimmunethrombocytopenia，NAIT）也不时有病例报道，其主要因素是人类PLT抗原抗体反应，但Saito［5］却发现了1年中3例HLA抗体引起的NAIT。Kiefel［6］等研究发

4、现输血患者的血小板同种异型抗体特异性与NAIT或输血后紫癜患者所观察到的明显不同。我国目前去白细胞血液成分的使用还不普遍，对血小板抗体检测的普及程度还很低，对血小板相关抗体引起的疾病还不够重视。因此，对血小板抗体研究必然会成为引人注目的课题，同时也可以与临床输血事业的发展相适应。1抗体检测方法常用的几种方法中，淋巴细胞毒试验（lymphocytecyto-toxicitytest，LCT）多用于分析单独的HLA抗体，而对于HLA及HPA混合抗体一般采用另外的方法:酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）、被动混合血凝

5、试验（PMHA）或固相分析、血小板单克隆特异性抗体固定试验（monoclonalantibody-specificimmobilizationofplateletanti-gens，MAIPA）等等，据报道这几种方法都比LCT方法更灵敏，34%血清在ELISA中有反应而LCT阴性［7］。血小板凝集试验也在某些实验室用于检测HPA-2抗体。抗-HPA-1b和抗-HPA-5b出现的频率远多得多，人们发现HPA-5b抗体单独出现常比其他HPA抗体特异性出现的多。Kiefel等［6］在多次输血的患者中发现了多例HPA特异性抗体。1.1LCT很多实验室用LCT来筛检HLA-Ⅰ类抗

6、体，因为这一实验所需的血清和淋巴细胞量少，既便宜又方便，可用来处理大量的样本，但其也存在一些缺陷。用LCT方法，一般使用18～60株不等的型特异性已知的细胞，谱细胞供者提供的淋巴细胞被保存在液氮中并仅在试验使用当天才被融化，也有实验室用60个O型供者混合细胞作筛查用，用于LCT的淋巴细胞的选择要重视以下的原则:（1）必须包含大多数LCT）和抗球蛋白增强MCLT两种方法检测HLA-Ⅰ类抗体，评估抗球蛋白增强MLCT在筛查和鉴定HLA-Ⅰ类抗体的作用，对145例多次输血的等待骨髓移植的恶性血液患者的血清样本和健康的骨髓供者的血清样本进行检测，结果抗球蛋白增强MLCT表现出了

7、比MLCT更高的灵敏性（也更具特异性）;患者致敏后以及以后的一段相当长的时间里，抗球蛋白增强MCLT比MLCT更早检测到HLA-Ⅰ类抗体，MLCT从145例患者中检测出了14例（9.7%）有HLA-Ⅰ类抗体，而抗球蛋白增强MLCT从145例患者中检测出了19例（13.1%），更有甚者相同的血清样本用抗球蛋白增强MLCT方法检测出了另外的HLA-Ⅰ类特异性。而且抗球蛋白增强MLCT比MLCT提前了3～4天检测出了HLA同种免疫的抗体。研究也显示，当抗球蛋白增强MLCT方法进行血小板交叉配血为阴性后可以得到满意的血小板输血后的计数提升，而用M