苍耳子提取物抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究论文

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1、苍耳子提取物抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究论文【摘要】目的研究苍耳子提取物对鸭乙型肝炎的抗病毒作用。方法选1日龄北京雏鸭，人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)后随机分为5组：苍耳子提取物3个剂量组（1，0.1和0.01g·kg-1·d-1），对照组采用生理盐水和拉米夫定(3TC，2mg·kg-1·d-1)，每组6只，灌胃10d，观察不同剂量苍耳子提取物抗DHBV作用效果。结果苍耳子提取物(1g·kg-1·d-1)剂量组对延缓鸭肝病理改变有一定的作用.freelFructusXanthiiduckhepatitisBviru

2、s.MethodsOne-dayoldducksinfectedalmodel.TheDHBVpositiveducksongthegroups,threeonesFructusXanthii（1，0.1and0.01g·kg-1·d-1）for10days,controlgroupsivudine(3TC,2mg·kg-1·d-1).ResultsThehighconcentrationofextract(1g·kg-1·d-1)coulddelaypathologicalchangesofduckliver.Butt

3、hethreeconcentrationsofextracthadnoeffectonDHBVDNAinthisexperiment.ConclusionFructusXanthiimightdelaypathologicalchangescausedbyDuckHepatitisBVirus.KeyFructusXanthii;DuckhepatitisBvirus全世界现有乙型肝炎病毒性（HBV）感染者约4亿，每年50万～120万人死于慢性HBV感染及其导致的肝硬化和肝癌［1］，研发有效地抗病毒药物是当前科研工作者的

4、重要任务。我国中草药资源丰富，毒副作用小，开展中草药抗HBV研究将成为今后我国科研工作者的研究方向之一。苍耳子始载于《千金·食治》，系菊科植物苍耳XanthiumsibiricumPatr的成熟带总苞果实，味辛苦，性温，有毒。在抗病毒研究上，曾有用苍耳子液治疗扁平疣获得较好疗效；姜克元［2］采用苍耳子醇提取物研究其抗疱疹病毒作用，结果表明，苍耳子提取液1∶5稀释可抑制病毒的生长，1∶10稀释可抑制100TCID50。引起扁平疣的人乳头状病毒和疱疹病毒均属DNA病毒，乙肝病毒的核酸为DNA，苍耳子是否具有抗HBV的作用，本

5、实验选用中草药苍耳子提取物，利用雏鸭作为动物模型，研究苍耳子提取物抗鸭乙型肝炎病毒的作用。1材料试剂与动物：苍耳子提取物(本院自制)，鸭血清标本、DHBV阳性血清、斑点杂交试剂(重庆医科大学)，拉米夫定［葛兰素威康（苏州）制药有限公司］；市售1日龄北京鸭。2方法2.1动物模型北京鸭经腹腔注射0.1ml阳性血清，9d后取血，分离血清，-70℃保存待检。2.2药物治疗筛选出感染成功的阳性鸭30只，随机分为5组，每组6只。苍耳子提取物分高、中、低3个剂量组，分别为1，0.1和0.01g·kg-1·d-1灌胃，1次/d，给药10

6、d；空白对照组选取为感染DHBV阴性雏鸭。空白对照组及模型对照组以生理盐水代替药物；拉米夫定（3TC）作为治疗对照组；以2mg·kg-1·d-1灌胃，1次/d，给药10d，分别用于药前(T0)，用药第5天(T5)，用药第10天(T10)和停药后第3天(P3)。自鸭颈静脉取血，分离血清，-70℃保存待检。2.3检测方法采用赖氏法测定血清ALT/AST活性，斑点杂交法测积分光密度光度值(IOD)，并取停药3d的鸭肝做病理切片，观察组织学改变。2.4统计学处理用药组不同时间含量与用药前比较，采用成组t检验；用药组同一时间含量与

7、病毒对照组比较，采用成组t检验。3结果3.1鸭肝HE染色切片用药前后的病理变化图1为正常鸭肝细胞；经DHBV感染后，鸭肝细胞（图2）出现明显空泡变性，胞浆疏松，汇管区可见炎细胞浸润，有点状出血、坏死；3TC鸭肝细胞（图3）形态正常；使用不同浓度苍耳子提取物的雏鸭，其肝细胞（图4～6）均有不同程度空泡变性、肿胀，部分可见汇管区及小叶间隔炎症细胞浸润，其中，苍耳子提取物高剂量组肝细胞水肿程度较轻，好于病毒对照组，随着苍耳子浓度降低，肝细胞病变程度逐渐加重，苍耳子提取物低剂量组肝细胞空泡变性程度较重，与病毒对照组无差异，并可见

8、坏死、增生现象。3.2T0，T5，T10及P3鸭血清中DHBVDNA的变化将阳性雏鸭随机分为5组，T0→T5→T10→P3各时期用药组与同期病毒对照组分别采血检测血清中的DHBVDNA，斑点杂交实验结果显示：实验期间病毒对照组血清中DHBVDNA量较稳定，未见自然转阴者；阳性药物3TC组T5、T10与T0比较DHBV