电针上调δ阿片受体的表达减轻大鼠急性缺血性脑损伤

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1、电针上调δ阿片受体的表达减轻大鼠急性缺血性脑损伤作者：田雪松，周飞，杨茹，夏萤，吴根诚，郭景春【摘要】探讨δ阿片受体（deltaopioidreceptor,DOR）在电针抗急性脑缺血损伤中的作用。方法：51只大鼠随机分为假手术组、假电针组、模型组、电针组、DOR拮抗剂+电针组。除假手术组外，其余各组均用大脑中动脉线栓法致大鼠局部脑缺血并行再灌注。电针于再灌注时开始，持续30min。再灌注24h后检查神经功能缺损程度、脑梗死体积。另取12只大鼠分为假手术组、模型组、电针组和DOR拮抗剂+电针组，蛋

2、白印迹法检测脑组织中DOR蛋白的表达。结果：与模型组、假电针组比较，电针组脑梗死体积减小（P<0.05），神经功能缺损评分增加（P<0.05）。电针组60kD的DOR蛋白表达较模型组增加（P<0.05），36kD的DOR蛋白表达有增加趋势，但差异无统计学意义。DOR拮抗剂+电针组脑梗死体积、神经功能缺损评分与模型组和假电针组比较，差异无统计学意义，DOR蛋白表达和模型组比较，差异亦无统计学意义。结论：电针通过增加DOR的表达减轻缺血性脑梗死和神经功能缺损。【关键词】电针;短暂性脑缺血

3、;阿片受体δ;大鼠　　Objective:Toexploretheeffectofδopioidreceptor(DOR)inelectroacupuncture(EA)protectingthebrainagainstacuteischemicinjury.Methods:Fiftyoneratslydividedintoshamischemiagroup,ischemiagroup,shamEAgroup,EAgroup,andEA+DORantagonist(naltrindole)grou

4、p.Transientfocalcerebralischemia(1hour)iddlecerebralarteryocclusion(MCAO)method.EAin,startingimmediatelyaftertheonsetofreperfusion.Neurologicaldeficitscoresandvolumeofcerebralinfarctionlydividedintoshamischemiagroup,ischemiagroup,EAgroupandEA+naltrindol

5、egroup.DORprotEInexpressionsiagroupandshamEAgroup,EAsignificantlyreducedischemicinfarctionandneurologicaldeficits(P<0.05);EAsignificantlyincreasedtheexpressionof60kDDORprotein(P<0.05)andtendedtoincreasethatof36kDDORprotein(P>0.05).CAO）所致局灶性脑缺血再

6、灌注大鼠模型上，观察电针对大鼠神经功能、脑梗死体积和DOR蛋白表达的影响，以探讨DOR蛋白表达在电针抗急性脑缺血损伤中的作用。　　1材料与方法　　1.1主要试剂与仪器　　DOR拮抗剂naltrindole、荧光染料DiI（fluorescentdye1,19dioctadecyl6,69di(4sulfophenyl)3,3,39,39tetramethylindocarbocyanine）、βactin单克隆抗体均购自Sigma公司。兔多克隆抗DOR抗体1560、辣根过氧化物酶抗兔I

7、gG购自Chemicon公司。电化学发光荧光显影剂购自SantaCruz公司，水合氯醛购自上海试剂一厂。血气分析仪（990，瑞士AVL公司），图像分析系统（Q570，德国Leica公司），立体定向仪（NarishigeST7,日本ScientificInstrumentLab），荧光显微镜（DMIRB,德国Leica公司），EA治疗仪（G6805II，上海医疗仪器厂），激光多普勒血流仪（PeriFlux5000，瑞典Perimed公司），28号针灸针、1000Ω电阻和XJ4210A型示波器（上海新

8、建仪器设备有限公司）。　　1.2动物分组　　63只雄性SD大鼠，由中国科学院上海实验动物中心提供，清洁级，合格证号为SCXK（沪）20030003，体质量（230±5）g，自由进食，正常光照。其中51只大鼠中48只按随机数字表法分成4组：假电针组、模型组、电针组、naltrindole+电针组，每组12只。剩余3只大鼠为假手术组。另外12只大鼠分为假手术组、模型组、电针组、naltrindole+电针组，用于蛋白印迹法检测DOR。　　1.3侧脑室给药及