阿片受体在瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用

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1、河北医科大学硕士学位论文阿片受体在瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用姓名：熊颖芬申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：吕艳霞201203中文摘要阿片受体在瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用摘要目的：本实验通过建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型，观察阿片受体兴奋剂瑞芬太尼及其拮抗剂纳洛酮对肾脏组织学和肾功能及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、蛋白激酶C(PKC)蛋白表达水平和PKC活性的影响，以探讨阿片受体在瑞芬太尼减轻肾脏缺血再灌注损伤中的作用。方法：成年雄性Sprague．Dawley(SD)大鼠75只，随机分

2、为5组：假手术组(S组)、模型组(M组)、瑞芬太尼组(R组)、纳洛酮组(N组)、纳洛酮+瑞芬太尼组(NR组)，每组15只。S组只暴露双侧肾动脉但不予夹闭，余四组均采用夹闭双侧肾动脉45min再恢复灌注的方法制备大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。R组和NR组于缺血前15min至再灌注30min内经尾静脉持续输注瑞芬太尼1．O“g·kg"1．min一，S组、M组和N组给予等容量生理盐水替代；N组和NR组于缺血前20min经尾静脉注射纳洛酮0．3mg／kg，间隔55min再次静注相同剂量纳洛酮，S组、M组和R组给予等容量生理盐水替代。各组于再灌注24h时经股静脉

3、采集血样和经膀胱抽取尿样各lml，分别用于测定血清肌酐(sCr)和尿素氮(BUN)浓度及尿N．乙酰．氨基葡萄糖苷酶(NAG)和丫．谷氨酰转肽酶“．GT)水平。并于再灌注24h时处死大鼠取肾组织标本，光、电镜下观察肾脏组织结构变化，并用黄嘌呤氧化法测定SOD活性、硫代巴比妥酸法测定MDA含量、免疫组化法测定肾组织PKC蛋白表达水平及ELISA法测定肾组织PKC活性。计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，P

4、管无明显扩张，管腔内未见坏死脱落细胞。M组肾小管上皮细胞水肿、空泡变性、坏死，肾小管明显扩张，管腔内可见大量坏死脱落细胞，部分管腔内可见管型。R组肾小管上皮细胞轻度水肿，部分肾小管扩张，管腔内仅见少量坏死脱中文摘要落细胞。N组和嗍肾组织病理学变化与M组相近。2电镜观察sgt肾小管上皮细胞内线粒体未见肿胀、空泡变性、嵴无断裂，微绒毛排列整密。M组肾小管上皮细胞内线粒体变形、肿胀、大部分嵴融合或缺失，微绒毛稀疏。R组肾小管上皮细胞内线粒体稍扩张、部分嵴融合或消失，微绒毛排列较整密。N组和NR组肾小管上皮细胞超微结构变化与M组相近。3血清Cr和BUN浓度及

5、尿NAG和丫．GT水平与S组比较，余四组血清Cr和BUN浓度及尿NAG矛I]T．GT水平均升高(P<0．05或0．01)。与M组比较，R组上述四指标均降低(PO．05)。4肾组织MDA含量和SOD活性与S组比较，余四组肾组织MDA含量均升高，而SOD活性均降低(P

6、1)。M组、N组和NR组的二指标3组间比较差异无统计学意义(尸>0．05)。5肾组织PKC蛋白表达PKC在肾小管上皮细胞内表达：S组呈淡黄色的弱阳性表达；M组、N组和NR组较S组染色略深；R组呈棕黄色颗粒聚集的强阳性表达。与S组比较，M组、N组和NR组肾组织PKC蛋白表达水平(E]]AOD)虽有增强，但差异无统计学意义(尸>0．05)，R组肾组织PKC蛋白表达水平明显增强(户

7、C蛋白表达水平3组间比较差异无统计学意义俨>O．05)。6肾组织PKC活性与S组比较，余四组肾组织PKC活性均升高(PO．05)。结论：阿片受体能介导瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤，机制与其被瑞芬太尼激活后使肾组织ROS蓄积减少、PKC蛋白表达上调及PKC活性增加有关。关键词：瑞芬太尼；纳洛酮；阿片受体；肾脏；再灌注损伤英文摘要Ther

8、oleofopioidreceptorsinremifentanilattenuatingrenal-I■^