葛花对酒精性肝损伤保护作用的研究

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1、葛花对酒精性肝损伤保护作用的研究【摘要】　　目的研究葛花对急性酒精性肝损伤的作用机理。方法取昆明种小鼠40只，随机分成两组。对照组生理盐水0.20ml/10g灌胃，给药组葛花水提液0.20ml/10g灌胃，30min后均灌酒0.24ml/10g，90，150min后每组各取小鼠10只眼眶采血测定血中乙醇浓度；取雄性昆明种小鼠30只，随机分成空白对照组、模型对照组、给药组，前二组生理盐水0.20ml/10g灌胃，后一组葛花水提液0.20ml/10g灌胃，30min后前一组灌生理盐水0.24ml/10g，后两组灌酒0.24ml/10g，如此反复

2、，连续9d，第9天灌胃30min后处死小鼠，用1.15%预冷KCl制作肝匀浆液，测定肝中丙二醛（MDA）的含量、谷胱甘肽转移酶（GST）的活性。结果给药组90，150min血中乙醇浓度均显著低于对照组（P<0.05）。给药组MDA值较模型对照组明显降低（P<0.01）、GST值较模型对照组明显升高（P<0.05）。结论葛花水提液可通过促进乙醇代谢，减少MDA，增加GST而护肝。【关键词】酒精性肝损伤　葛花　丙二醛　谷胱甘肽转移酶　　急性酒精中毒又称醉酒，是指一次饮酒过量而导致的中枢神经系统、消化系统、呼吸系统、心脑血管系统

3、等的损伤过程。当前酒滥用(alcoholabuse)和酒依赖性(Alcoholism)已成当今世界范围内最严重的社会经济和公共卫生问题之一［1］。中国传统医学对酒早有认识，李时珍在《本草纲目》中指出“酒，天之灵禄也，少饮则和血、行气、壮神、御寒、消愁，痛饮则伤神、耗血、损胃、亡精、生痰、动火”。现代医学认为脂质过氧化反应对酒精中毒所致肝损伤的形成和发展起着十分重要的作用［2］。本次实验观察了葛花水提液对急性酒精中毒所致肝损伤的保护作用并对葛花水提液护肝的作用机理作了初步研究。　　1材料与方法　　1.1药品与试剂葛花水提液(本实验室自配)；无

4、水乙醇(天津市化学试剂有限公司)，批号：20061118，密度0.79；仲丁醇(天津化学试剂有限公司)，批号：20051129，密度0.81；肝素钠注射液(常州千红制药有限公司)，批号：20060131。　　1.2动物及分组取小鼠40只，体质量18～22g，实验前12h禁食不禁水随机分成两组，对照组和给药组，每组20只，分别灌服生理盐水0.2ml/10g，葛花水提液0.2ml/10g，30min后灌服56度白酒二倍稀释液0.24ml/10g，于酒后90，150min每组各取10只小鼠经眼眶采血0.5ml，放入EP管中(肝素抗凝)备测。取雄性

5、昆明种小鼠30只，随机分成3组。空白对照组生理盐水0.20ml/10g灌胃，30min后给生理盐水0.24ml/10g；模型对照组生理盐水0.20ml/10g灌胃，30min后给酒0.24ml/10g；给药组葛花水提液0.20ml/10g灌胃，30min后给酒0.24ml/10g，连续9d，第9天给酒30min后处死小鼠，用1.15%预冷KCl制作肝匀浆液，测定丙二醛（MDA）的含量、谷胱甘肽转移酶（GST）的活性。　　1.3仪器上海天美GC－7890型检测器，电恒温加热器，SHZ－88式水浴恒温振荡器，UV-1601双光束紫外分光光度计，

6、低温高速离心机，－85℃超低温冰箱，DY89－1型电动玻璃匀浆机，250μl气密型注射器。　　1.4乙醇浓度的测定取仲丁醇标液1ml和血样0.25ml放入顶空瓶中，用内衬聚四氟乙烯膜的硅胶垫密封，置电热恒温器中60℃加热30min，然后用250μl气密型注射器吸100μl进样，用气相色谱法测定组分乙醇和内标物仲丁醇的色谱峰面积比(Ai/As)，根据公式Ci=3.686×(Ai/As)×0.81计算血中乙醇浓度［3］。　　1.5MDA、GST含量的测定用双光束紫外分光光度计用TBA比色法［4］测定MDA，参考Habig介绍的方法［5］，测定C

7、DNB与GSH之间的非酶结合反应（即非酶管OD340）。计算方法MDA含量=（OD535nm－OD520nm）/（e×D）=△OD×10-2/（1.56×D）（mmol/gliver）　　D：每克肝重e：1.56×105M-1cm-1　　肝GST活性计算方法GST(mmol·min-1·g-1)=（酶管OD340-非酶管OD340）×1000ε×肝蛋白量（mg）　　e：即克分子消光系数，为9.6cm-1·mmol·g-1。　　1.6统计学处理结果均用t检验统计。　　2结果　　2.1血中乙醇浓度的变化结果见表1。由表1可见，给药组90，150

8、min乙醇血药浓度均小于对照组（P＜0.01）。表1复方解酒药对小鼠乙醇浓度变化的影响（略）　　2.2小鼠肝中MDA、GST的变化结果见表2。表2葛花水提液对肝MDA含量和GST