肝功能异常患者血清中自身抗体检测及意义

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1、肝功能异常患者血清中自身抗体检测及意义作者：杨滨，陈静，薛恒，刘灿，欧启水【关键词】肝炎,自身免疫性；,自身抗体；,荧光抗体技术炎　　摘要:目的探讨肝病相关自身抗体在肝功能异常患者血清中的阳性率及其诊断价值。方法以生物薄片马赛克技术制备的Hep2细胞、猴肝、心肌、鼠肝、鼠肾、胃共6种组织细胞为抗原基质，间接免疫荧光法检测肝病相关自身抗体，根据荧光反应强弱判定结果。结果80例肝功异常患者（肝脏功能异常，ALT>50U/L）自身抗体阳性率为11.25%，其中抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）

2、及抗线粒体抗体（AMA）的阳性率分别为7.5%、5%和6.25%；女性患者自身抗体的检出率明显高于男性患者（P<0.05）；病毒性肝炎标志物阴性组自身抗体检出率明显高于阳性组（P<0.05）。结论高滴度自身抗体对自身免疫性肝病的诊断有一定的价值，肝功能异常的非病毒性肝炎病人适合进行肝病相关自身抗体的检测。　　关键词:肝炎,自身免疫性；自身抗体；荧光抗体技术炎　　自身免疫性肝脏疾病是一组病因与发病机理尚不完全清楚但与自身免疫相关的一组疾病，包括自身免疫性肝炎（AIH）、原发性胆汁性肝硬化（P

3、BC）和原发性硬化性胆管炎（PSC）[12]。实验室检测特别是相关自身抗体的检测对自身免疫性肝病的诊断具有重要意义。某些自身抗体由于缺乏疾病特异性，不仅见于自身免疫性疾病，也出现于10%～15%的病毒性肝炎或其他免疫介导的疾病当中[1]。为了探讨包括抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）、抗肝肾微粒体Ⅰ型抗体（LKMⅠ）、抗线粒体抗体（AMA）等自身抗体在肝病患者中检出的阳性率和意义，笔者收集80例肝功能明显异常的各种肝病患者，检测其血清中上述几种自身抗体，报告如下。　　1临床资料　　1.1一般资

4、料选择2005年2月～5月来福建医科大学附属第一医院就诊的80例肝功能明显异常的各种肝病患者，男性57例，女性23例，年龄（46±15.6）岁（20～75岁）。80例中，确诊为病毒性肝炎54例，包括乙肝48例、丙肝5例、甲肝1例；非甲丙戊肝炎3例，包括胆石症、酒精肝和肝豆状核变性各1例；其余23例为不明原因的肝功能异常者。同时收集30例健康体检者作为对照组，年龄（41±12.5）岁（22～61岁）。　　1.2方法所有对象均于清晨空腹抽取静脉血2mL，分离血清，以ELISA法做病毒性肝炎血清标志物检测，

5、同时以间接免疫荧光法检测血清中的相关自身抗体，包括ANA、SMA、LKMI及AMA。试剂来源为德国欧蒙免疫试剂公司生产的自身抗体试剂盒。血清检测时主要采用Hep2细胞、猴肝、鼠肝、鼠肾、心肌和胃组织冰冻切片作为抗原，采用生物薄片马赛克技术将带有组织细胞的6种切片组成一个反应区，4℃保存备用。将待检血清1∶100稀释后与组织细胞孵育30min，后加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白结合30min，经洗片、封片后荧光显微镜观察结果；ELISA法检测全部血清病毒性肝炎标志物，包括抗HAVIgM、HBsAg、HBs

6、Ab、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV抗体和抗HEVIgM/IgG等，其中抗HAVIgM试剂盒购于上海华泰生物工程实业有限公司，HBV试剂盒购于上海荣盛生物技术有限公司，抗HCV抗体和抗HEVIgM/IgG购自洛阳华美生物工程有限公司。　　1.3结果判定在同一张切片中根据荧光模式特点可同时判定出下列几项自身抗体：ANA、AMA、SMA、LKM和抗心肌抗体（ASA）。血清稀释度ANA>1∶1000、SMA>1∶320、AMA及LKM>1∶100时组织细胞内出现特异性绿色荧光

7、判为阳性，未见荧光反应者为阴性。　　1.4统计学方法计数资料用χ2检验。　　2结果　　2.1自身抗体的阳性检出率80例患者中，9例（11.25%）出现1项或>1项自身抗体阳性：ANA（+）且AMA（+）3例、单纯AMA（+）1例、ANA（+）且SMA（+）2例、单纯SMA（+）3例，明显高于对照组的检出率（ANA7.5%，AMA5%，SMA6.25%，P<0.05）；未检出LKM。　　2.2性别与自身抗体检出率的关系见表1。　　表1性别与自身抗体检出的关系（略）　　Tab1Therelat

8、ionshipbetarkersofviralhepatitis　　χ2=5.39，P<0.05.　　　　3讨论　　尽管自身抗体在自身免疫性肝炎发病机制中的确切作用尚未得以证实，但其在诊断疾病、了解病程和观察疗效中有很重要的价值。目前，已经发现与自身免疫性肝炎有关的自身抗体包括ANA、SMA、抗骨架蛋白抗体、抗肌蛋白抗体、LKM和AMA等，其中常用的有ANA、SMA、LKM、AMA和可溶性肝抗原抗体等。依据这些抗体，不仅可以实现对自身免疫性肝炎的诊