肝功能异常的乙肝患者血清中自身抗体检测分析.pdf

《肝功能异常的乙肝患者血清中自身抗体检测分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山东医药2012年第52卷第7期肝功能异常的乙肝患者血清中自身抗体检测分析翁厚光，曹维克，张迎梅，吴尚农，张媛媛(南京医科大学附属淮安第一医院，江苏淮安223300)摘要：目的探讨自身抗体在乙型肝炎发生和发展中的作用。方法收集肝功能明显异常的115例乙肝患者、60例健康体检者(正常对照)的血清标本，采用间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)；免疫印迹法检测抗线粒体抗体(AMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM)；实时荧光定量PCR法检测HBV．DNA水平。结果对照组、乙肝组、肝硬化组及肝癌组自身抗体总阳性率依次升高，P均<0．05。乙肝组急性乙肝

2、、慢性乙肝、重症乙肝自身抗体总阳性率依次升高，P均<0．05。肝硬化组自身抗体总阳性率低于肝癌组，但两者比较差异无显著性。HBV—DNA阳性者自身抗体总阳性率高于阴性者，但差异无统计学意义。结论HBV感染可诱发自身免疫反应，其产生的多种自身抗体可促进乙型肝炎的发生和发展。关键词：乙型肝炎；自身抗体中图分类号：R512．62文献标志码：B文章编号：1002—266X(2012)07-0067~2我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高流行区，滑肌抗体(SMA)：采用间接免疫荧光法检测，试剂据统计，一般人群乙肝表面抗原阳性率为9．09％，购自德国欧蒙公司，以两种基质(HEP-2细

3、胞、大鼠其中约有1／4的携带者由急性乙肝将转成慢性肝胃)制成的生物薄片作为抗原，待测血清自1：100起炎、肝硬化和原发性肝癌⋯。研究发现，乙肝的发稀释，与基质经温育30rain，洗涤后加入异硫氰酸荧生和发展可能涉及对自身抗原的免疫应答(包括自光素标记的羊抗人IgG结合30min，再温育，洗片、身抗体应答和自身反应性CD；CTL细胞应答)，其封片后荧光显微镜观察结果。组织或细胞内出现特产生多种自身抗体，导致肝细胞的免疫损伤和炎症异性黄绿色荧光判为阳性，未见荧光反应者为阴性。坏死J。2008年3月一2010年5月，我们对115例血清稀释度>1：100为阳性，>1：1000为强

4、阳性。肝功能异常的乙肝患者行血清中自身抗体检测，现②抗线粒体抗体(AMA)、抗肝肾微粒体抗体分析结果，探讨自身抗体在乙型肝炎发生和发展中(LKM)：采用免疫印迹法检测，试剂购自德国欧蒙的作用。公司。将待检血清1：50稀释，取30加入1．51资料与方法mL稀释液中与膜反应，室温水平振荡孵育60min，1．1临床资料同期收治的乙肝患者血清标本洗膜，滴加酶标记抗人IgG，室温平摇60min，洗膜，115例，其中男63例、女52例，年龄18～72岁，平均加NBT／BCIP显色10rain，用蒸馏水终止反应，用48岁。其中乙型肝炎71例(乙肝组，包括急性乙肝标准对照条带图观察特定区

5、域条带，清晰可见着色20例，慢性乙肝31例，重症乙肝20例)，乙肝后肝带判为阳性。硬化21例(肝硬化组)，乙肝后原发性肝癌23例1．2．2HBV-DNA水平检测采用实时荧光定量(肝癌组)。均根据流行病学、临床症状、体征、实验PCR技术检测，试剂由华美生物工程公司提供，英室检查和(或)肝活体组织检查证实，肝功能明显异国TECANEPCR仪。常(ALT、AST水平高于正常参考值上限2倍以上)。1．3统计学方法所有实验数据均利用SPSS15．0另收集60例体检健康者作为对照组，其中男35例、统计软件进行处理，计数资料采用X检验，P≤女25例，年龄20～70岁，平均45岁；两组年

6、龄、性0．05为差异有统计学意义。别差异无显著性。2结果1．2观察项目2．1血清自身抗体阳性率各组检查结果见表1。1．2．1血清自身抗体①抗核抗体(ANA)、抗平由表1可见，对照组、乙肝组、肝硬化组及肝癌组自身抗体总阳性率依次升高，P均<0．05。乙肝组急通讯作者：曹维克性乙肝、慢性乙肝、重症乙肝自身抗体总阳性率依次67山东医药2012年第52卷第7期升高，P均<0．05。肝硬化组自身抗体总阳性率低肝癌患者自身抗体总阳性率显著高于急性乙肝(P于肝癌组，但两者比较差异无显著性。<0．05)，乙肝后肝硬化组和乙肝后原发性肝癌组2．2HBV．DNA与自身抗体的关系115例乙肝患

7、自身抗体总阳性率明显高于乙型肝炎组(P<者中HBV．DNA阳性69例，检出18例24项次自身0．05)；虽然乙肝后肝硬化组和乙肝后原发性肝癌抗体，其总检出率为26．09％，HBV．DNA阴性46组自身抗体总阳性率两者差异无显著性(P>例，检出8例11项次自身抗体，总检出率为0．05)，但乙肝后肝硬化组自身抗体总阳性率还是17．39％。两者总检出率比较差别无统计学意义，见低于乙肝后原发性肝癌组，还有HBV．DNA阳性组表2。与阴性组自身抗体总阳性率分别是26．09％、表l各组自身抗体检出率比较17．39％，两者差异无统计学意义(