毕业论文 初稿

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1、学号：122060102010届本科生毕业论文（设计）题目：响应面法优化盾叶薯蓣内生菌SYt1发酵条件学院(系)：生命科学学院专业年级：生物工程061班学生姓名：杜成志指导教师：秦宝福副教授完成日期：2010.06.12目录摘要11引言21.1关于薯蓣皂苷元21.1.1薯蓣皂苷元功能和应用21.1.2薯蓣皂苷元生产现状31.2产活性物质植物内生菌的研究进展31.2.1内生菌概述31.2.2内生菌的生物学作用41.2.3内生菌产生物活性物质研究的意义和展望51.3响应面法在发酵条件优化中的应用51.4薯蓣皂苷元的含量测定方法概述61.5本项目的研究基础及意义72材料与方法82.1试验材料

2、82.1.1实验菌种82.1.2试剂、仪器与设备82.2实验路线92.3试验方法92.3.1菌种活化92.3.2种子制备92.3.3摇瓶发酵体系92.3.4发酵液中薯蓣皂苷元的提取92.3.5薯蓣皂甙元的含量测定102.3.6实验设计103结果与分析133.1标准曲线的绘制133.2预发酵试验143.3单因子实验143.4Plackett-Burmen试验153.5最陡爬坡试验164讨论174.1硫酸根离子对皂素产量的影响174.2关于Plackett-Burman实验的失败184.3关于皂素的提取与测定184.4关于进一步优化的建议18参考文献19致谢22响应面法优化盾叶薯蓣内生菌S

3、Yt1发酵条件响应面法优化盾叶薯蓣内生菌SYt1发酵条件作者：杜成志指导教师：秦宝福(西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100)摘要：盾叶薯蓣内生菌SYt1可以合成薯蓣皂苷元。本实验采用单因子实验、Plackett-Burmen设计、最陡爬坡实验和响应面实验相结合的方法以期对薯蓣内生菌SYt1合成皂素的发酵条件进行优化。通过单因子实验筛选出最适碳源为蔗糖，最适氮源蛋白胨。Plackett-Burmen实验表明蛋白胨、MgSO4和NaCl是影响皂素产量的重要因素。但是最陡爬坡试验结果异常，没有得到最优发酵条件。关键词：盾叶薯蓣；内生细菌；薯蓣皂苷元；响应面法；优化Optimiza

4、tionofFermentationConditionsofEndogennticBacteriumSYt1fromDioscroeszingbiberensisusingResponseSurfaceMethodologyAuthor:DuChengzhiTutor:QinBaofu（CollegeofLifeScience，NorthwestA&FUniversity，Yangling，Shanxi，712100）Abstract：EndogennticbacteriumSYt1isolatedfromDioscroeszingbiberensiscanproducediosgen

5、in.Inthisexperiment，single-factortestcombinedwithPlackett-Burmendesign、thepathofsteepestaccentexperimentandresponsesurfacemethodologywasconductedtooptimizethefermentationconditionstoproducediosgeninbySYt1.Bysingle-factortesttheoptimumcarbonsourceandnitrogensourceconfirmedassucroseandpeptonerespe

6、ctively.Plackett-Burmenexperimentindicatedthatpeptone、MgSO4andNaClwerethesignificantfactorsthataffecttheyieldofdiosgenin.However,thedatasofthepathofsteepestaccentexperimentwereabnormal,andtheoptimumconditionshadnotbeenfound.Keywords：Dioscroeszingiberensis;endogeneticbacterium;diosgenin;responses

7、urfacemethodology;optimization22响应面法优化盾叶薯蓣内生菌SYt1发酵条件1.引言盾叶薯蓣(DioscoreazingiberensisC.H.Wright)，隶属于薯蓣科薯蓣属，为多年生草质缠绕藤本。以其根状茎入药，称为黄姜，为我国传统常用中药材。主要活性成分为薯蓣皂苷元(diosgenin)，因含量高，质量好，为合成肾上腺皮质激素类药物的重要原料[1]。全国皂素资源植物调查资料显示，盾叶薯蓣的皂甙元含量最高，