美洲矾根愈伤组织诱导及其快繁技术体系研究

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1、美洲矾根愈伤组织诱导及其快繁技术体系研究摘要：以矾根（Heucheramicrantha）植株不同器官为外植体材料，MS培养基为基本培养基，探索了矾根组织培养与快繁技术体系。结果表明，选取幼芽作为外植体时快繁效率最高，最适芽诱导培养基配方为MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA，采用4/5MS+0.2mg/LNAA的生根培养方案较为适宜。中国8/vie　　关键词：矾根（Heucheramicrantha）；组织培养；愈伤组织；快繁　　中图分类号：S682.36；Q813.1+2文献标识码：A：0439-8114（2017）

2、05-0973-03　　DOI：10.14088/j.ki.issn0439-8114.2017.05.047　　StudyonCallusInductionandItsRapidPropagationSystem　　inAmericaHeucheramicrantha　　CHENJin，YANGKan-kan，elon，Changsha410125，China）　　Abstract：ThedifferentorgansofHeucheramicranthaasexplantsentbyMSmediumbasicmediumtoexp

3、lorethetissuecultureandrapidpropagationsystemofHeucheramicrantha.Theresultsshoumbudinductionmediumformulag/L6-BA+0.5mg/LNAA，andthemostsuitablerootingculturemediumg/LNAA.　　Keyicrantha；tissueculture；callus；rapidpropagation　　矾根（Heucheramicrantha）又名珊瑚铃，是虎耳草科矾根属多年生草本花卉[1，2]。

4、在美国的园林景观中应用广泛，也是近些年从国外引入的多年生宿根花卉[3，4]。矾根具有喜半荫、耐全光、浅根性、耐寒性和耐寒性强生理等特性[5-8]，多适用于园林林下花境、地被、庭院绿化等[9]。其主要采用分株方式繁殖，因品�N更新速度快，而母株数量较少，导致扩繁速度缓慢，短期内难以大规模成苗[10，11]。若大批量引进种苗又价格昂贵，这极大地制约了矾根类花卉品种更新和应用的速度。本试验以紫色宫殿矾根为材料，研究矾根类花卉组培快繁和基质育苗技术，为国内矾根类花卉工厂化育苗技术提供实践指导和技术依据。　　1材料与方法　　1.1材料　　矾根采

5、自湖南省西瓜甜瓜研究所试验基地花卉棚，分别选取其幼芽、叶柄和叶片为外植体材料。　　1.2试验方法　　1.2.1外植体预处理和筛选取外植体前一个月施用800倍稀释后的多菌灵杀菌2次。选取生长势旺盛、无病虫害且幼芽侧芽多的植株，且外表无明显病斑和污物，用1%洗洁精溶液浸泡30min，后用流水冲洗1h。将外植体转入超净台上无菌三角瓶中，用75%乙醇加0.1%Tin，期间放入摇床180r/min振荡。再经无菌水洗涤5～8次，去除残留升汞。在MS+0.5mg/L6-BA+5g琼脂粉+30g蔗糖培养基上培养，依据愈伤组织诱导率确定最适宜外植体。　

6、　1.2.2继代培养基的筛选以MS为基本培养基，添加不同浓度植物生长调节剂，30d后观察各类培养基配方下愈伤组织生长势及芽增殖数量。　　1.2.3生根培养以不同浓度大量元素的MS培养基为基本培养基，添加0.5mg/LNAA+6g琼脂粉+30g蔗糖+0.2g活性炭。培养条件为22℃，光周期为16h光照+8h黑暗，光照度2000～3000lx。　　1.2.4炼苗移栽移栽前，在苗床大棚中放置3～5d，使其适应大田自然光温环境。而后开盖适应有菌环境5d，期间适当喷水保湿，防止幼苗萎蔫。再洗去瓶苗基部培养基，并移栽入细泥炭与河沙（1∶1，V∶V

7、，下同）混合基质中。　　2结果与分析　　2.1不同外植体材料对矾根愈伤组织诱导率的影响　　试验选取日光温室栽培矾根幼芽、叶柄、叶片、茎段各100个作为外植体材料（重复3次），消毒后转入诱导培养基中（培养基加入头孢青霉素500mg/L，羧苄青霉素500mg/L），以愈伤组织诱导率确定适宜外植体。由表1可知，矾根幼芽的诱导率最高，达到74%，且死亡率较低，与叶柄和叶片相比，是比较适合的组培材料。图1为矾根幼芽诱导培养形成的愈伤组织。　　2.2愈伤组织继代培养和芽诱导增殖　　将经过初代培养后获得的带有愈伤组织的无菌芽体转入各类诱导芽增殖的培

8、养基中进行继代培养45d，继代培养基基本配方为MS+6g琼脂粉+30g蔗糖+200mg/L头孢青霉素+200mg/L羧苄青霉素。试验结果（表2）显示，当6-BA浓度为2.0mg/L和NAA浓度为0.5mg/L时，幼芽增殖