异硫氰酸苯己酯PHI对HL60细胞PI3KAkt信号转导通路影响的实验分析

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1、-学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名（手写）：__________导师签名（手写）：_______________________年____月____日____________年____月____日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并

2、向国家有关部门或机构（如国家图书馆、中国学术期刊电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文数据库》、中国科学技术信息研究所的《中国学位论文全文数据库》等）送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。（保密的学位论文需办理相关手续，在解密后适用本授权书）作者签名（手写）：__________导师签名（手写）：_______________________年____月____日____________年____月____日1---万方数据---目录原创性声明………

3、……………………………………………………………….1缩略词表………………………………………………………………………….3中文摘要………………………………………………………………………….4英文摘要…………………………………………………………………………5前言………………………………………………………………………….6第一部分：PHI和/或LY294002对HL-60细胞株的细胞增殖及凋亡影响……9材料和方法结果讨论第二部分：PHI和/或LY294002对HL-60细胞组蛋白乙酰化修饰及PI3K/Akt信号转导通路的影响…………………………………………………19材料和方法结果讨论结论………

4、………………………………………………………………..31参考文献………………………………………………………………………..32致谢………………………………………………………………………..36综述………………………………………………………………………..372---万方数据---缩略词表HAThistoneacetyltransferases组蛋白乙酰化酶HADChistonedeacetylases组蛋白去乙酰化酶HDACihistonedeacetylaseinhibitor组蛋白去乙酰化酶抑制剂PHIphenyhexyleisothiocyanate异硫氰酸苯己酯RPMrevolu

5、tionsperminute每分钟转数mTORmammaliantargetofrapamycin哺乳动物雷帕霉素靶PI3Kphosphatidylinositol3-kinase磷酯酰肌醇3激酶AktproteinkinaseB蛋白激酶BMTTtetrazoliumsalts四苯基氮唑蓝FCMflowcytometry流式细胞术phosphatidylinositol3'-kinaseLY294002inhibitor,2-(4-morpholinyl)PI3K/Akt抑制剂-8-phenyl-4H-1-benzopyran-4-oneTSAtrichostatinA曲古抑菌素Phos

6、phataseandtensinhomolog与张力蛋白在10号染色PTENdeletedonchromosome体同源缺失的磷酸酶---3万方数据---PHI对HL-60细胞PI3K/Akt信号转导通路影响的实验研究研究生：杨惠聪导师：章涛教授马旭东教授中文摘要【目的】研究异硫氰酸苯己酯(PHI)对HL-60细胞株增殖、凋亡的作用，及对HL-60细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响，与经典的PI3K/Akt信号转导通路抑制剂LY294002联合用药，探讨PHI影响PI3K/Akt信号转导通路的可能机制。【方法】采用MTT方法绘制PHI和/或LY294002作用于HL-60细胞后的生长

7、曲线；采用使用AnnexinV/PI双染试剂盒经流式细胞仪定量检测细胞凋亡的变化；用蛋白免疫印迹法（WesternBlot）检测HL-60细胞组蛋白乙酰化H3、H4水平及PI3K/Akt信号转导通路蛋白表达水平的变化。【结果】（1）PHI和LY294002都能抑制HL-60细胞增殖并能诱导HL-60细胞凋亡，随作用时间延长及浓度的增加，凋亡率逐渐上升，呈时效及量效关系，联合用药后变化更加明显；（2）PHI处理HL-60细胞7小时可见