检测尿微量蛋白和ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义

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时间:2018-12-02

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1、检测尿微量蛋白和Ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义[摘要]目的:探讨尿标本中视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、微量白蛋白(mALB)及Ⅳ型胶原(ⅣC)检测在糖尿病肾病早期诊断中的作用。方法:用ELISA法检测尿中RBP、TRF及ⅣC,免疫比浊法检测尿微量白蛋白(mALB),酶偶联法测定尿肌酐。结果:正常对照组中尿rBP/Cr、TRF/Cr及ⅣC的含量分别为(2.12±0.95)mg/mmol,(1.81±0.52)mg/mmol,(44.68±17.2)ng/ml。在糖尿病无肾病组中,其mALB的含量与正常对照组相近(P>0.05),而R

2、BP、TRF及ⅣC的含量与正常对照组相比差异具有显著性(P<0.05)。在糖尿病的初期肾病组和临床肾病组,mALB、RBP/Cr、tRF/C的及ⅣC的含量均明显高于正常对照组(P<0.01)。结论:联合检测尿RBP、TRF及ⅣC是诊断糖尿病肾病早期损伤灵敏、可靠的实验室指标。  [关键词]糖尿病肾病;视黄醇结合蛋白;转铁蛋白;Ⅳ型胶原  糖尿病肾病(Diabeticnephropathy,DN)为糖尿病(Diabetesmellitus,DM)的一种严重慢性并发症,在糖尿患者的死亡原因中占有较大比例,故早期诊断对DM的防治和预后具有重要意义。在早期肾

3、活检发现组织学改变时,临床上常无症状,尿常规与肾功能检查均可正常。目前肾病的实验室诊断多以尿微量蛋白、肌酐等作为主要诊断指标,这些指标也难以发现肾脏的早期损害。本资料联合检测尿中视黄醇结合蛋白(RbindingprotEin,RBP)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)等微量蛋白和Ⅳ型胶原(TypeⅣcollagen,ⅣC),以期早期发现肾脏损害,进而有助于筛选及检出早期DN。  1 材料与方法  1.1 研究对象  1.1.1 正常对照组 50例,为健康体检人群,男28例,女22例,平均年龄(35.2±10.8)岁。  1.1.2 糖尿病组 

4、按患者尿微量白蛋白排泄率(Urinaryalbuminexcretionrate,UAER)将其分为3组。DM1组:UAER<30mg/24h,为无肾病组共15例。DM2组:UAER在30mm/24h~300mg/24h,为初期肾病组共17例。DM3组:UAER>300mg/24h,为临床肾病组共18例。  1.2 方法  1.2.1 尿微量白蛋白(mALB)肌酐测定 免疫比浊法测定mALB,试剂由伊利康生物制品公司提供。同时用BeckmancX7全自动生化分析仪测量尿肌酐,试剂由美国贝克曼公司提供。结果以mALB/Cr表示,单位为mg/mmol。  1.

5、2.2 尿RBP、TRF测定 留取除晨尿外的尿液,离心收集上清液,根据磺基水杨酸尿蛋白定量结果进行不同倍数的稀释。采用ELISA法,按福建太阳生物技术公司提供的试剂盒说明书进行测定,结果分别以RBP/Cr、TRF/Cr表示,单位为mg/mmol。  1.2.3 尿ⅣC测定 由于ⅣC在尿中浓度较低,需对标本进行浓缩。其操作为在离心后的尿液标本中缓慢依次加入SigmaChemical CO,出品的10g/L牛γ球蛋白0.8ml和5ml的450g/L的PEG4000,在4°C孵育5min后,于冷冻离心机离心,弃上清液,再用生理盐水充分溶解至1ml,即得到

6、10倍浓缩尿标本。将浓缩后的尿标本采用ELISA法,按中国科学院上海细胞生物研究所施高生物技术实业有限公司生产的ⅣC测定试剂盒说明书进行测定,单位为ng/ml。  1.3 数据统计 实验数据以±s表示,以单因素方差分析进行数据处理,部分指标进行相关分析,P<0.05为差异有显著性。  2 结果  正常对照组与DM各组间尿中mALB、RBP、TRF及ⅣC含量的比较见表1。在正常对照组、糖尿病无肾病组、初期肾病组及临床肾病组中其尿中的mALB、RBP、TRF及ⅣC含量均呈递增趋势。其中在无肾病组(DM1)其mALB含量与正常对照组差异无显著性(P>0.0

7、5),而RBP、TRF及ⅣC含量均已高于正常对照组(P<0.05)。在初期肾病组(DM2)尿中mALB、RBP、TRF及ⅣC4种微量蛋白的含量与正常对照组相比均有显著升高(P<0.01),且高于无肾病组(P<0.05)。在临床肾病组(DM3)尿中上述4种微量蛋白的含量与对照组、无肾病组及初期肾病组相比,均呈显著性升高,其中增加的倍数以mALB为最。  表1 正常对照组与糖尿病各组间尿微蛋白检测结果比较(略)  注:与正常组相比*P<0.05,**P<0.01  3 讨论  DM患者并发DN的死亡率为未并发肾病者的30倍,一旦发生临床DN,则缺乏有效方法

8、制止其发展,故早期诊断对DN的防治和预后尤为重要。由于早期肾脏病有

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