专题2细胞工程知识总结

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1、专题2细胞工程(一)植物细胞工程1.理论基础(原理)：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉干细胞〉体细胞;植物细胞〉动物细胞2.植物组织培养技术(1)过程：离体的植物器官、组织或细胞一-＞愈伤组织一-＞试管苗一-直物体(2)用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产(3)地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育楨物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术：(1)过程：勸细腳H原生质脚去壁翻细胞乙上-‘原生祕乙氣新的原生植物细孢A①再生细腿■卜杂种醐脱靴愈伤组织再分化杂种植株原

2、生质体A植物细抱Bi生质体B(2)原理:细胞膜的流动性、细胞的全能性.(3)诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激:化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。(4)意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。(二)动物细胞工程1.动物细胞培养(1)概念：动物细胞培养就是从动物机体屮取出相关的组织将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。杂种细絶(2)动物细胞培养的流程:杂种植株剪碎幼龄动物醐或鵬单个鵬细胞悬液^^＞细胞贴壁生长胰蛋白酶传代培养►细胞悬液竹►细胞株或细胞系(3)细胞贴壁和接触抑制：娃液中分

3、散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称力细胞贴壁。细胞数0不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分.•糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微:W:元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度:适宜温度：哺乳动物多是36.5°C+0.5'C:pH：7.2〜7.4。④气体

4、环境:95%空气+5%C02。0。是细胞代谢所必耑的，C0：的主要作川是维持培养液的pH。（5）动物细胞培养技术的应用：①生产生物制品：疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②作为基因工程中的受体细胞；③检测有毒物质及毒性大小；④科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾病等。（6）动物细胞培养与植物组织培养的区别—植物组织培养动物细胞培养理论基础（原理）细胞的全能性细胞增殖培养基的物理性质固体液体（合成培养基）培养基的成分水、矿质元素、蔗糖、氨基酸、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等过程外植体（离体根、茎、叶等）（半）固体培

5、养基愈伤组织——-胚状体再

6、培养基

7、人工胚乳分1光照1和种皮试管幼苗人工种子翻，1植株-1动物胚胎或幼龄动物的组织器宮剪碎1胰蛋白酶处理单个细胞1埼葬液细胞悬浮液坊养瓶中丨筇龆细胞株1传代培养

8、（11~40或50代）细胞系（遗传物质发生改变）结果新的植株或纟11织新的细胞株或细胞系用途①植株快速繁殖②脱毒植株的培育②人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①牛《产蛋白质制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等：②检测有毒物质；③研宂药理病理；④移植治疗相同点都需人工条件下的无飽操作，需要适宜的温度、PH、02等特别注意以下

9、几点：1）.动物细胞培养基成分特有的动物血清含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种成2）.两技术手段培养过程屮都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。3）.植物组织培养最终产生新个体，体现全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现全能性。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为歷胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作;卵（母）细胞含有激活细胞核全能性的物质和营养条件。(3)体细胞核移植的大致过程

10、是：(如图)(4)体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，増大存活数量；③作为生物反应器生产珍贵的医用蛋白；④转基因克隆动物作为异种移植的供体;⑤人核移植胚胎干细胞诱导分化后提供组织、器官用于移植等。(5)体细胞核移植技术存在的问题：①克隆动物的成功率很低.②兑隆动物存在着毽邃问题、表现出遗传和生理缺陷.③克隆动物食品的安全性问题等。2.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂

11、交细胞。(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。(3)动物细胞融合的意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，成力研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段