疫苗中甲醛残留量检测方法的研究进展

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1、疫苗中甲醛残留量检测方法的研究进展马秋冉张璐杨星于晓辉中国兽医药品监察所摘要：甲醛在疫苗牛产中常作为灭活剂，但随疫苗注入机体后，会对机体产牛一系列刺激性反应，因此需对疫苗中甲醛残留量进行严格控制。近几年随着科学技术的发展，疫苗屮甲醛残留量检测方法也得到了改进。本文对近年來疫苗中甲醛残留量检测方法及其应用的研究进行了综述，涉及到的检测方法主要有乙酰丙酮法、品红亚硫酸法、变色酸法、酚试剂分光光度法、气相色谱法和液相色谱法，以期为今后的相关研究提供参考。关键词：疫苗;甲醛;残留量;作者简介：丁•晓辉，E-ina订:yuxiaohui@ivdc.com.cn收稿日期：2016-07-19Progres

2、sinresearchondeterminationmethodsforresidualformaldehydecontentinvaccinesMAQiu-ranZHANGLuYANGXingYUXiao-huiChinaInstituteofVeterirmryDrugControl;Abstract：ObjectiveFormaldehydeisusuallyusedasaninactivotingagentinvaccineproduction,whichmaycauseaseriesofstimulatingreactionafterinjectionofthevaccineinto

3、body.Therefore,itisnecessarytostrictlycontroltheresidualformaldehydecontentinvaccines.Inrecentyears,withtherapiddevelopmentofscienceandtechnology,thedeterminationmethodsforresidualformaldehydecontenthavebeenimproved.Thispaperreviewstheprogressinresearchondeterminationmethodforresidualformaldehydecon

4、tentinvaccines,includingacetylacetonemethod,sulfurousacid-magcnteimethod,chromotropicacidtest(CAT)、MBTI1spectrophotometry,gaschromatographyandliquidchromatography,whichisexpectedtoprovidearefereneefortherelatedresearchesinfuture.Keyword：Vaccine;Fonnaldehyde;Residues;Received：2016-07-19甲醛作为亲电试剂，可与多种带

5、负电荷的生物大分子发生反应，形成可逆的加合物或不可逆的交联物，如DNA、RNA和多糖。甲醛本身对机体具有较高的毒性,是公认的致癌、致畸和基因毒性物质，在我国有毒化学品优先控制名单上高居第二位⑴。RAMON等和GLENNY等宜发现，经福尔马林处理后的H喉毒素的毒性可明显降低，其机制可能为甲醛与蛋口质的氨基结合，使蛋口质凝固，进而有效的降低毒素毒性［4-5］。自此之后，甲醛作为灭活剂被用于多种疫苗生产中住口。残留的甲醛随疫苗注入机体后，会对机体产生一系列刺激性反应总1，因此需对疫苗中甲醛残留量进行严格控制。木文就近年来在疫苗中甲醛残留量测定方法及其应用作一综述，以期为今后的相关研究提供参考。1分光

6、光度法分光光度法是甲醛测定的传统方法，仪器价格低，普及程度高，是最常用的检验方法。主要有乙酰丙酮法、品红亚硫酸法、变色酸法、酚试剂分光光度法等。近年来实验人员不断改进各种分光光度法，使之更为方便、有效、快捷、实用。1.1乙酰丙酮法乙酰丙酮法的原理在丁甲醛在醋酸-醋酸鞍缓冲溶液中，与乙酰丙酮反应生成黄色化合物3,5-二乙酰基-1,4-二氢毗噪，该化合物在410nm波长处有最大吸光度值，通过比色定量可计算疫苗中甲醛残留量。李燕等回采用乙酰丙酮法测定5家疫苗生产企业生产的12批禽流感灭活疫苗的甲醛残留量，用以研究甲醛残留量与产蛋率的相关性，实验屮发现，甲醛浓度在0.T0.5mg/ml范围内，与吸光度

7、具有较好的线性关系，相关系数为0.993~0・998。田文莉等［10］建立了一种新型乙酰丙酮分光光度法，该方法从测定波长、乙酰丙酮、醋酸、醋酸钱浓度及用量，保温时间、降温时间对原方法进行优化。新方法中甲醛浓度在r50ug/ml范围内,标准曲线线性关系良好,冋收率为101.9%,且最低定量限可达lPg/ml，可适用于疫苗屮甲醛残留量较低时的常规检测。李志刚等［11］通过正交实验分析乙酰丙酮显色液的配