右旋柠烯对人胃癌生长及转移抑制作用的实验分析

《右旋柠烯对人胃癌生长及转移抑制作用的实验分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、右旋柠烯对人胃癌生长及转移抑制作用的实验研究博士研究生：路晓光指导教师：冯秉安教授指导小组：邢光明教授战丽彬教授专业名称：中西医结合临床摘要胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤。我国每年死于胃癌的病人约16万人，居各种恶性肿瘤之首。手术切除为胃癌治疗之首选。然而单纯手术技术的提高并未能使所有病人摆脱死亡的厄运，仍有相当数量的病人因局部或腹腔内复发及远隔脏器转移而死亡。故此，强调手术并辅以化疗等综合手段治疗胃癌已为人们当前的共识。随着分子生物学技术的发展，一系列联合化疗方案及旨在提高胃癌手术切除率、减少复发、防止转移的术前、术中、术后辅助化疗手段应运

2、而生，使胃癌手术的效果得到了明显改善。然而，由于胃癌组织自身的特征，即其多形性与异质性，尽管随着手术技术及化疗等综合手段的进步，其治愈率在逐年提高，但经过根治性切除的胃癌患者五年生存率仍徘徊在20一50％。故此，寻找确切有效的化疗药物作为辅助成为胃癌防治研究的重要方向。化疗药物的选择，必须满足疗效确切可靠、毒副作用低的特点。传统化疗药物氟尿嘧啶、丝裂霉素C、阿霉素与表阿霉素、顺铂、卡氮介以及近年来涌现5一FU的衍生物脱氧氟脲苷、优福定、嘧啶亚硝脲、鬼臼乙叉甙、甲酰四氢叶酸等，这些药物据报告对胃癌都有较好的疗效，但他们都不可避免地存在着骨髓抑制

3、等毒副作用及肿瘤耐药性等棘手问题难以克服。祖国医学将胃癌归于中医的噎嗝、反胃、胃脘痛等范畴，对胃癌病机的认识主要包括气滞、血瘀、痰凝、毒聚和正气内虚等方面。既有痰瘀瘕积等邪实，又有气血大亏脾胃虚弱等正虚。本虚标实，治宜攻补兼施，以补为主，重在益气养血，滋阴育阳，健脾调胃，佐以活血化瘀，软坚散结。大量研究表明，肿瘤的发生不仅与细胞增殖异常有关，而且与细胞凋亡的异常有着密切关系。对癌变机制的体细胞突变学说、多阶段学说、癌基因活化及抑癌基因失活等学说的探讨，均证明胃癌的发生和演化是一个多步骤、多阶段、多基因参与的复杂过程。现代医学研究显示，胃癌的发

4、生、发展与细胞凋亡过程的失控关系密切。细胞凋亡(apoptosis)即程序性细胞死亡(programmedcelldeath，PCD)，是别于细胞坏死的另一种细胞死亡方式，其形态学及生物化学改变具有自身特点。肿瘤微血管的形成、癌基因与抑癌基因等相关基因调控失衡造成了胃癌的侵袭与转移。目前抗胃癌治疗研究的热点在于如何诱导和调控肿瘤细胞凋亡。更好地了解抗胃癌药物的凋亡机制可能有助于制定更加合理的治疗方案。中药作为胃癌的辅助治疗药物以其疗效确切、毒性作用轻微以及价格低廉引起人们的关注。目前开展的有关大蒜素、姜黄素、三氧化二砷等中药提取物的各项基础性

5、研究均证明它们对胃癌生长有抑制作用。陈皮为芸香科常绿小乔木植物橘CitrusreticulataBlanco及其同属多种植物的成熟果实之果皮，别名橘皮。其性味为辛、苦，温；归脾、肺经。具有理气、调中、燥湿、化痰的作用。用于脾胃气滞所致的脘腑胀满、嗳气、恶心呕吐；湿浊中阻所致的胸闷腹胀、纳呆倦怠、大便溏薄、舌苔厚腻等证。柠烯(1imonene)学名卜甲基一4一异丙基环己烯，是橘皮精油中的主要成分。其中的右旋柠烯(D．1imonene)是一种单萜烯类化合物。广泛存在于芸香科柠檬、柑桔精油及其它植物中。具有抗氧化，抗炎，利胆溶石等作用。近年来人们发

6、现D．1imonene具有抗癌活性，用于研究预防及治疗化学致癌剂诱导的动物结肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、胰腺癌等，取得了相当的效果。目前对D．1imonene抗癌作用的研究主要集中在对动物肿瘤的防治方面，D．1imonene直接作用于人肿瘤的研究报道尚少。我们用D．1imonene分别作用于人胃癌细胞株和裸鼠原位移植瘤模型，通过其对人胃癌生长和转移的抑制作用及其机理的研究，探讨D．1imonene诱导人胃癌细胞凋亡分子水平的作用机理与作用环节。为D．1imonene的临床应用提供理论依据。第一部分右旋柠烯对人胃癌细胞的生长抑制作用

7、目的探讨右旋柠烯(D．1imonene)对人胃癌细胞的生长抑制作用及其机制。方法以不同浓度的D．1imonene作用于SGC．7901、BGC．823及AGS三种不同类型人胃癌细胞株，采用噻唑蓝(MTT)比色法检测D．1imonene对细胞存活的影响；流式细胞仪检测细胞生长周期与凋亡率：DNA凝胶电泳检测细胞凋亡；光学显微镜与电镜观察形态学改变；采用免疫细胞化学方法检$4p53、bax、bcl．2相关基因的蛋白表达。结果经D．1imonene处理的三种人胃癌细胞生长抑制率增加。与药物浓度成正相关。流式细胞仪测定见细胞周期的GI期前有亚2倍体的

8、凋亡峰，当药物浓度为0．25I_tg／m_l(48h)时，凋亡细胞的发生率(与对照组比较)，SGC-7901细胞株从2．29±0．43(％)上升至33．5l±lO．