elisa法检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因的分析

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1、ELISA法检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因的分析张宏（内蒙古自治IX林丙县医院检验科025250）【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）11-0270-02【摘要】目的探讨EUSA法检测乙肝表面抗原时出现假阳性的原因及对策。方法随机对220例门诊传染科患者空腹血清选用统一的试剂，相同的酶标仪，操作人员及釆用EUSA法进行乙肝表面抗原检测。结果出现25例乙肝表面抗原阳性患者，后有釆用乙肝表面抗原金标法进行复检，在25例阳性中有5例为阴性，最后再将25例表面抗原阳性血清进行乙肝病毒DNA滴度测

2、试，出现5例阴性,并且和乙肝表面抗原金标法测试的5例相同。结论EUSA法检测乙肝表面抗原时影响因素较多，严格控制操作环节是降低乙肝表面抗原假阳性的关键。【关键词】EUSA法乙肝表面抗原假阳性利用双抗体夾心法是检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）最常用的ELISA法,但由于标木、检测环节、实验仪器及环境等因素影响，在实际工作中仍然会出现少量的乙肝表面抗原假阳性结果。木文对220例门诊患者空腹血清标木进行测试乙肝表面抗原，就出现假阳性结果进行分析，探讨及总结出现假阳性原因及防止对策。1资料与方法1.1资料随机对2010年3月至2010年6月

3、来我院门诊传染科220例患者空腹血清选用统一的试剂，相同的酶标仪，操作人员及釆用ELISA法进行乙肝病毒表面抗原检测。1.2方法采用EUSA法中的双抗体夹心法。试剂选用北京万泰生物药业股份有限公司生产的乙肝表面抗原检测试剂盒。药品批准文号：国药准字S10980090。乙肝表面抗原金标法试剂选用艾康生物技术（杭州）有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂（胶体金法），试剂均在有效期内，严格遵循试剂操作步骤及相关作业指导书进行测试。1.3仪器酶标仪选用深圳雷杜奋限公司提供的RT-2000i酶标仪及其配套的中文处理系统。1.4标准阴阳性判

4、定标准是利用RT-2000i酶标仪测试的吸光度值0D值≥COV为阳性，标本0D值＜COV值为阴性；Cutoff值计算公式：(：07=阴性对照平均0D值×2.1。HBV-DNA含量结果低于检测值考W数在103以下判定患者乙肝表面抗原为阴性。2结果对2010年3月至2010年6月来我院门诊传染科220例患者空腹血清进行乙肝病毒表面抗原测试。结果220例患者中ELISA法检测出25例HBsAg阳性患者。再利用乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂(胶体金法)试剂条进行复检，结果25例阳性患者血清出现5例阴性结果。最后再•选用HBV-

5、DNA含量测试25例阳性患者血清，结果出现5例阴性(检测值考W数＜103),并且和胶体金法测试的阴性结果相一致。其结果显示在220例患者血清中HBsAg假阳性为5例(5/220,2.3%)。3讨论乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外壳蛋白，HBsAg不具右伟炎性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。乙型肝炎是由于乙型肝炎病毒引起的一种传染病，该病在世界各地广泛流行。也是我国当前流行最广泛、危害最严重的一种传染病［1】。在我国被乙型肝炎感染的人群高达10%左右。全国HBsAg阳性者约1.2亿，其中有7800

6、万人发病。0前，国内外对HBsAg阳性转阴性治疗，缺乏冇效的特异性手段。因此加强乙型肝炎的预防工作极其重要［2】。利用双抗体夹心法是检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)最常用的EUSA法。但是利用ELISA法监测HBsAg吋要注意实验操作过程中的每一个环节，否则容易出现2%的假阳性［3］。本组220例患者血清利用ELISA法监测HBsAg吋，出现5例假阳性(5/220,2.3%)，与有关学者的研究相接近。因此在经过乙肝病毒表面抗原金标法和HBV-DNA实验证实后对EUSA法监测HBsAg出现假阳性总结分析如下。3.1实验前的质量控制在利

7、用ELISA法监测HBsAg实验前要从临床医护及人员下医嘱和采血开始就要进行检验质量控制。依据患者临床症状需要采集检验血液标本，但患者出现黄疤、高脂血症及采血方式影响标本出现溶血的因素吋，都要在利用ELISA法监测HBsAg吋要倍加注意检测结果与分析，这些因素极易导致HBsAg出现假阳性，误导检验医师及临床的诊治［4］。3.2实验中的质量控制标本在送到实验室，检验医师要严格执行检验标本接收制度，核查不合格标本进入检验环节。检验人员在利用EUSA法监测HBsAg吋要详细阅读试剂说明书及掌握EUSA法作业指导书的内容。从加样、洗板、加酶液

8、、上酶标仪测试及最后判定结果［5】，其中每一步都得具冇责任性强，严格每一步的操作规程，尤其在判定结果吋要严格参照吸光度值0D值≥COV为阳性，标本0D值＜COV值为阴性的判定规则，不可用肉眼进行外观颜色的判读，如此