hedgehog信号通路在尖锐湿疣皮损患者中的影响研究

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1、Hedgehog信号通路在尖锐湿抚皮损患者中的影响研宄【摘要】目的:探讨Hedgehog信号通路三个关键蛋白Patched-1、Gli-1以及Smo在尖锐湿抚患者发病中的作用。方法:本组共收集56例尖锐湿疣患者、40例尖锐湿庞治疗患者以及20例正常人,应用EUSA、Western以及RT-PCR法检测尖锐湿抚皮损患者、咪喹莫特治疗一个疗程后观测患者及正常人皮肤中Patched-1、Gli-1以及Smo的蛋白及mRNA的表达特点。结果:三组Patched-1、Gli-1以及Smo三个指标ELISA以及Western蛋白、RT-PCRmRNA表达,患者组均明显高于

2、对照组(P【关键词】尖锐湿统;咪噎莫特乳膏;Patched-1;Gli-1;Smo[Abstract]Objectives:Toinvestigatetheinfluenceofthreeproteins,Patched-1,Gli-1andSmo,intheHedgehogsignalingpathwayongenitalwartspatientswithlesions.Methods:ELISA,WesternandRT-PCRwereusedtodetectPatched-1,Gli-1andSmoproteinsandtheexpressionofmR

3、NAofgenitalwartspatientswiththelesionstreatedwithimiquimod.Theresultwascomparedwiththatofnormalpeople.Results:Therewere56casesofgenitalwartsuntreatedpatients,40casesofgenitalwartsintreatmentgroupand20casesinthecontrolgroup.Thelevelofthreekeyproteins,Patched-1,Gli-1andSmoofthepatient

4、groupweresignificantlyhigherthantheseofthenormalgroupaswellastheexpressionofmRNA(P14相关指标检测方法Patched-l、Gli-l以及Smo的测定方法为Elisa法,同时WesternBlot以及RT-PCR进一步确认。15WesternBlot检测取05mL表皮提取液,5000r/min离心提取上清液,BCA定量蛋白,取各样本80ug行聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳,取电泳后目标蛋白半干转法移至PVDF膜,加牛奶封闭2h后取出,加相应一抗洗涤3次,之后加相应二抗洗涤3次,暗室内曝光洗

5、片,扫描仪扫描胶片图像、ImageJ计算各灰度值,3-actin作内参对照。16RT-PCR检测取样本总RNA提取试剂盒提取总RNA,定量,定量后每取2Pg逆转录cDNA;逆转出cDNA立即行PCR扩增目的片段,扩增次数为35次;扩增出DNA片段后电泳,电泳完成后用凝胶成像仪拍照,Imagej软件计算荧光强度值,3-actin作内参对照。17统计学处理所有数据处理均用SPSS190统计学软件软件,计量资料以均值土标准差(土s)表示,各组间比较采用t检验,以P[6]李萍,冯世军,朱文胜,等.Patched-1和Gli-1在尖锐湿抚皮损中的表达及意义.山东医药,2

6、012,52(36):88-89.[7]苏明,程浩,盛彩霞,等.尖锐湿疣患者角质形成细胞中活化型细胞外信号调控蛋白激酶和活化型p38的检测.中华皮肤科杂志,2004,37(10):569-571.[8]StockflethE,MeyerT,PolyphenonE.Ointmentfortreatmentofexternalgenitalwartsandpossiblefutureindications.ExpertOpinBiolTher,2014,14(7):1033-1043.[9]GuoLY,LiuP,WenY,etal.Sonichedgehogsig

7、nalingpathwayinprimarylivercancercells.AsianPacJTropMed,2014,7(9):735-738.[10]刘强,胡芳,赵静,等.YKL-40和VEGF在尖锐湿疣组织中的表达及意义.第二军医大学学报,2013,34(6):639-644.[7]白晓燕.Hedgehog信号通路在EGFR-TKI敏感和耐药非小细胞肺癌细胞中的作用机制研宄.南方医科大学,2013.[8]LjubojevicS,SkerlevM.HPV-associateddiseases.ClinDermatol,2014,32(2):227-234

8、.[9]PsutkaR,PriestP

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