serozyme磁分离酶联免疫检测系统测定血清c肽、胰岛素及其临床评价

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1、SEROZYME磁分离酶联免疫检测系统测定血清C肽、胰岛素及其临床评价崔钟鑫苏屮翰刘学君(黑龙江省森工总医院检验科150040}【屮图分类号】R446.ll【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)27-0050-02【摘要】目的磁分离酶联免疫(磁酶免一一MAIA)测定内分泌激素是近年來从国外引进的一种非放射性标记高敏感免疫检测系统。结合临床实践需求，考核MAIA测定技术的准确性和可比性。方法对60岁以卜II型糖鉍病30例和非糖尿病30例用MAIA测定其血清基础C-肽(C-P)和基础胰岛素(INSULIN)水平。结果糖尿病组基础C-P高于

2、非糖尿病组，二组呈偏态分布，P<O.05.有差异。二组的基础INSULIN,P>；O.05,无差异。结论II型糖鉍病患者存在高C-P血症，MAIA方法测定C-P,INSULIN有其准确性和可比性。【关键词】MAIAC-PINSULINSEROZYME系统MAIA测定内分泌激素在国外己应用多年，近几年被国内引进。为考核其准确性与可比性，做了II型糖尿病与非糖尿病二组间的基础C-P与基础INSULIN测定与对比。1研宂对象选白在我科就诊的60岁以下的II型糖尿病和非糖尿患者各30例。2方法和材料2.1标本取3.0mL静脉血至试管屮，不加添加剂，在室

3、温下凝结、离心，分离血清部分，于2〜8"C贮存血清标本，稳定24h,若需长期保存，-20°C可保存30天(避免反复冻融)。2.2标准品A、B、C、D、E、F，6个标准品，做标准曲线时使用。2.3试剂二种抗C-P和抗INSULIN单克隆抗体（一种酶标单克隆抗体（Anti-ALP），另一种荧光素标记的单克隆抗体（Anti-FITC））、SEROZYME磁分离试剂0.6%、SEROZYME清洗浓缩液、SEROZYME基质液，SEROZYME终止液，SEROZYME对照液。2.4仪器磁分离器及SEROZYME-II型酶联免疫测定仪由北京倍爱康生物技术奋限公司提供

4、。3方法及原理该方法是酶联免技术与磁性微粒分离技术相结合的一种测定法。使用了二种高亲和力的单克隆抗体。酶标单克隆抗体，荧光素标单克隆抗体分别与标本抗原的不同部位结合，形成夹心三明治免疫复合物。磁性微粒联接的抗荧光素抗体与免疫复合物中的荧光素结合，形成聚合物，此聚合物在磁场的作用下分离,分离后聚合物中酶的含量与标本抗原量成正比，加底物后测定酶促反应呈色，可计算出标本抗原含量。4结果见表1。（略｝5结论II型糖尿病组存在高C-P血症，奋可能存在高胰岛素血症，MAIA方法测定冇其可比性和准确性。6讨论II型糖尿病的发病原因除遗传、环境因素以外，另一个重要的病因

5、就是胰岛素抵抗（高胰岛素血症和胰岛素分泌缺陷）。本文糖尿病组C-P基础值高于非糖尿病组可能就是这一因素的原故。测定INSULIN，C-P是检查β细胞功能的主要内容，因为β细胞中先合成前胰岛素元很快分解为胰岛素元最后分解为等分子量的INSULIN和C-P，二者之间无交叉反应。在血中二者之间比值恒定，而且C-P不受外源的胰岛素与胰岛素抗体的影响，故测C-P可以完全反应胰岛素水平，也就是说测C-P的意义比INSULIN大。本文结果表明二组的C-P有差异，而HIN-SULIN无差异的主要原因可能就在于此。测C-P可用于I、II型糖尿病的诊断，

6、判断II型糖尿病患者是否需用胰岛素治疗，用于酮症酸中毒患者以及各种低血糖的原因鉴别。临床中不仅要考虑胰岛素的水平，更应考虑C-P的水平。由于C-P在肾脏裂解，尿C-P可反应一段时间内的平均水平，比血C-P的意义更大，可以考虑应用MAIA技术开展尿C-P的测定。经广泛研究免疫活性INSNLIN和免疫活性C-P不够特异。需要建立前胰岛素和真胰岛素及苏中间代谢产物C-P附产物的测定方法，在测定中也提示C-P比INSULIN的意义明显。总之，越来越多的理由和实践经验显示β细胞功能测定的准确性和实用性C-P比INSULIN优越。磁酶联免疫测定技术在国外己

7、应用多年，近几年引进国内，由于它无放射性及其危害，对实验室条件要求低，磁分离不用离心，液相反应灵敏准确，可代替放免，检测速度快，比较适用于中小型医院专业科室。因具奋临床需求量大等优点，在国内开展很快，我科已开展了七项内分泌激素的测定。本文总结了我们所测C-P,INSULIN的部分资料结果与临床及理论-致。鉴于MAIA在我国开展吋间虽不长，但己较广泛，应尽快开展交流、研宄以严格质控，规范标准。参考文献[1】史轶繁.胰岛素的生理生化.协和内分泌代谢病学.北京：科技出版社，1999.[2】邓尚平.β细胞功能检查的临床研宄进展.第八届全国糖尿病学术会议

8、会议论文，上海.1998.