戴安液相色谱报告中拖尾因子

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划戴安液相色谱报告中拖尾因子　　改善反相HPLC中的峰拖尾　　在反相HPLC中峰拖尾是一个普遍的现象。特别是分离碱性化合物和通过HPLC分析药物成分时是经常产生拖尾缘由。峰拖尾可以引起分离度降低，灵敏度减弱，精密度和定量变差。图1表明峰之间的分离度和灵敏度与峰拖尾成负相关。图2表明准确度和精密度因数据系统无法准确识别峰的起点和终点而受到影响。　　图1拖尾对分离度和灵敏度的影响　　当峰拖尾从增加到时，分离度从降到。灵敏度由

2、于峰的体积增大和样品的浓度降低而降低。图2峰拖尾对准确度和精密度的不利影响。　　拖尾峰使数据系统难以准确确定峰的终点，故而影响准确度和精密度。在这个例子中，在B点测得到峰面积比在A点测得的峰面积少约3%。峰拖尾的原因，峰拖尾的主要原因有：1、溶解样品的溶剂比流动像更强，2、样品量过载，　　3、固定相中的硅醇基与胺类物质相结合反应，4、硅胶吸附酸性化合物，5、色谱柱柱床中有空隙。　　只要确定了拖尾的原因就可以采取措施减少拖尾并消除之。表1峰拖尾：原因及解决方案　　一、由于溶解样品的溶剂极性强于流动相而引起的拖尾目的-通过该培训员工

3、可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　如果溶解样品的溶剂极性强于流动相，就会引起宽的甚至是拖尾的峰。有几种线索可以帮助确定是由于此种原因引起的拖尾。第一种就是先流出的峰的拖尾较后流出的峰拖尾严重；另一种迹象就是进样量减少或者是样品经流动相稀释后进样峰拖尾减轻了。　　如果怀疑拖尾的原因是流动相的强度引起的，解决很简单。将样品溶解在流动相中，或者将样品

4、经流动相稀释至进样后峰拖尾符合要求。二、由样品量过载引起的峰拖尾　　当进样量超过柱子的容量，样品峰会呈现一个直角三角形。当更多的样品量注入时，峰的前端变得很尖而后端就拖尾更严重。另一个现象就是色谱柱过载后保留时间会随样品量的增加而提前。由样品过载引起的峰拖尾的解决方案就是减少进样量。表2提供了各色谱柱的直径及参考的最大进样量，表2还提供了进样量的范围，因为实际进样量依赖于柱子的填料，分析物质，和其他的因素比如样品在流动相中的溶解性。图3样品量过载引起的拖尾　　样品过载，峰的前端会变得尖锐，后端拖尾，保留时间会稍微提前。如果峰形看

5、上去有点像直角三角形，那么可能就是过载了。表2HPLC色谱柱的参考最大进样量　　表3反相HPLC常用缓冲液　　三、由固定相中的硅醇基与胺类相互作用引起的拖尾目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　在反相HPLC中出现拖尾的另一个常见的原因是由于带正电荷的溶液与固定相颗粒表面上的酸性硅醇发生了离子交换而引起的二次保留(图4)，具有显

6、著的硅醇活性的固定相的色谱柱大部分都会发生此现象，而且中性pH条件下比在酸性pH更易发生。　　酸性和中性的化合物一般不受影响，一些碱性化合物更易受到此效应的影响。如果是因为硅醇的原因引起的拖尾，可以从下面几部来纠正拖尾的问题。首先，确认流动相中有合适的缓冲盐，可能的话尽量在pH戴安液相色谱报告中拖尾因子)柱的性质。强度胺类，像三乙胺，不易从色谱柱上洗脱下来。那意味着用过含有TEA的色谱柱就不再适合应用于流动相中不含TEA的分析。　　图5向流动相中加入TEA用来提高峰形　　1、如果谱图中出现平头峰、分叉峰，该如何处理？　　答：1、

7、降低进样量；2、更换色谱柱；3、改变流动相的pH值　　2、按分离机理分，高效液相色谱法可以分为哪几类？　　答：液-固吸附色谱；液-液分配色谱；键合相色谱；凝胶色谱　　3、如何按固定相与流动相相对极性的不同将液液分配色谱进行分类？不同极性的物质在其上的出峰顺序如何？目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　正相分配色谱法－固定相的极性

8、大于流动相的极性；反相分配色谱法－固定相的极性小于流动相的极性。正相分配色谱：极性弱先出峰，极性强后出峰；反相分配色谱：与之相反。　　4、键合相色谱可分为哪两类？请举出至少两种固定相和流动相？　　正相键合相色谱：分配机理。固定相——极性键合固定相，如胺基、腈基、