月季的花药培养 参赛课件

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1、课题2：月季的花药培养万晓军生物工作室1E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374一、课题目标说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径，说出影响花药培养的因素，学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。二、课题重点与难点课题重点：选取适宜的培养材料和培养基。课题难点：选取适宜的培养材料和培养基。万晓军生物工作室2E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374（一）被子植物的花粉发育被子植物的花的结构是怎样的？观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应的时期吗？又有何特点？万晓军生物工作室3E-mail:12

2、23wxj@163.comQQ:719455374雌蕊：花丝花药：囊状结构，内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期万晓军生物工作室4E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。④1花粉母细胞4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生

3、殖细胞核有分8个精子万晓军生物工作室5E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374又称人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似种子的结构，能在一定的条件下萌发生长，形成完整植株。万晓军生物工作室6E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374（二）产生花粉植株的两种途径有哪两种途径？原因是什么？花药中的花粉花药中的花粉胚状体愈伤组织丛芽丛芽生根移栽花药培养产生花粉植株的两种途

4、径万晓军生物工作室7E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374（三）影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成万晓军生物工作室8E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374材料的选择：花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培

5、养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。万晓军生物工作室9E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。万晓军生物工作室10E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374（一）材料的选取染色镜检（二）材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸钙（三）接种和培养结果分析与评价万晓军生物工作室11E-mail:1223wxj@163.comQQ:719455374选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有

6、醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。万晓军生物工作室12E-mail:1223wxj@163.comQQ:7194553741、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）5、无菌水冲洗3~5次用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。万晓军生物工作室13E-mail:1223wxj@163.comQQ:71

7、9455374灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便