岭南药材广陈皮道地性研究及其产业化发展思路

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1、1•概况广陈皮为芸香科柑橘属植物,正品为茶枝柑(Citrusreticulata'Chachi')的干燥成熟果皮。主产于广东新会,又名新会陈皮。为”十大广药“之一。具有理气健脾、和胃止呕、燥湿化痰等多种功效。它与陈皮化学成分相近,主含挥发油、黄酮类和部分生物碱类、糖类化合物。2006年,家质量监督:检验检疫总局批准对新会柑及新会陈皮实施地理标志产品保护。2.广陈皮的研究现状及存在问题2.1化学成分方面主要集中在挥发性成分方面,非挥发性成分研究较少。2.2药理作用方面主要集中在抗肿瘤、抗氧化、抗炎、心血管等方面。2.3质量评价

2、方面多参考《中国药典》以橙皮昔为指标,在指纹图谱方面有一些相关报道,但研究不够系统、深入,难以反映广陈皮道地性的特色。3•本项目的研究目标及内容3.1化学成分方面采用各种分离手段,确定化学成分的类型与结构,争取发现一些广陈皮特有的化学成分。3.2药理作用方面对广陈皮各萃取部位及各单体成分进行抗氧化性评价,以进一步探明其药效的物质基础。3.3质量评价方面建立广陈皮药材的定量分析方法,对药材质量进行评价,并进一步揭示其道地性特色的物质基础。2.本项目的研究思路与方案见图1。3.具体研究内容5.1广陈皮化学成分的系统提取分离研究采

3、用常规层析方法共分离得到17个化合物,结合光谱和理化方法鉴定了其中15个化合物的结构,分别是橙皮昔、正二十九烷酸、B-谷笛醇、5-轻基-6,7,8,3’,4f-五甲氧基黄酮、橘皮素、川陈皮素、胡萝卜昔、阿魏酸、5-轻甲基糠醛、反式-对轻基桂皮酸、橙皮素、果糖、新橙皮昔、柚皮昔及蔗糖。其中7个为黄酮类化合物。本部分为药材药理活性、质量评价等后续研究打下了坚实的基础。实验中分离得到了三个有机酸,分别是正二十九烷酸、阿魏酸、对轻基桂皮酸,说明广陈皮富含有机酸;另外,除橙皮昔外,还发现了柚皮昔、新橙皮昔等昔类成分,这可能与广陈皮原植

4、物茶枝柑,尤其是其果实极其酸苦有一定的关联。图1研究的基本思路与实施方案5.2广陈皮多甲氧基黄酮类成分高速逆流色谱法的制备分离研究采用高速逆流色谱技术(HSCCC)以石油醯-乙酸乙酯-甲醇-水(1?0・8?0・9?0・7,v/v/v/v)为溶剂系统,从广陈皮石油醯部位中制备分离得到了4个多甲氧基黄酮类成分,分别是川陈皮素(A1)、3,5,6,7,8,3’,4’一七甲氧基黄酮(A2)、及橘皮素(A3)及5-轻基-6,7,8,3,,/-五甲氧基黄酮(A4);另外,以石油醯-乙酸乙酯-甲醇一水(1?0・8?0・7?0・8,v/v/

5、v/v)为溶剂系统,从广陈皮乙酸乙酯部位中制备分离得到了4个多甲氧基黄酮类成分,分别是5,7,&4’-四甲氧基黄酮(B2)、川陈皮素(B3),3,5,6,7,8,3Z,4’-七甲氧基黄酮(B4)及橘皮素(B5)o其中,3,5,6,7,&3,,/-七甲氧基黄酮(A2),5,7,&4,-四甲氧基黄酮(B2)单独采用常规柱层析法未能分离得到,且均为该植物中首次发现。制备所得到的化合物不仅可作为参考物质进一步应用于广陈皮的质量控制研究,又可为柑橘属的植物分类学研究提供一定的依据,且对于其他含有黄酮类药材的制备分离也提供了有益的参考。

6、另外,本实验结果亦证实,HSCCC技术是研究天然产物化学成分的有效手段,该方法简便、经济。5.3广陈皮黄酮类成分抗氧化活性评价(rutin)作以抗坏血酸(vitC)、榊皮素(quercetin)及芦1为阳性对照物,对提取分离得到的广陈皮各提取部位及黄酮单体进行清除有机自由基DPPH活性评价。实验结果表明,黄酮类化合物清除DPPH自由基能力与其上酚轻基的数目与位置密切相关。广陈皮中黄酮类化合物尤其是多甲氧基黄酮类成分并不具有良好的清除DPPH自由基能力。进行抗氧化能力评价的时候,应结合各方法的优劣,予以综合考虑评价。另外,结合

7、乙酸乙酯萃取部位所含化合物的类型(经提取分离得到了阿魏酸、反式-对轻基桂皮酸等酚酸类成分),推测其清除DPPH自由基能力可能主要是由其含有的其它酚类成分所致。5.4广陈皮药材的质量评价5.4.1HPLC定量分析方法的建立经优化,确定了药材最佳提取工艺:药材过140目筛,用100倍甲醇溶液超声提取30min,提取1次。经过优化,选定了广陈皮药材HPLC色谱分离条件。4.6mmi・d・,色谱柱:DIKMADiamonsilC18column(2505?m);保护柱:SecurityGuardTMC18(4.0mmX3.0mmi.

8、d.,5Pm);流动相:CH3CN-H20;流速:1mL/min;柱温:25°C;进样量:20uL;检测波长:283及330nm双波长检测。梯度洗脱条件:0〜15min,25〜50%乙膳;15〜35min,50〜60%乙睛;35〜40min,60〜85%乙睛。5.4.2不同贮藏年限广陈皮黄

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