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《大豆皂苷对d—半乳糖胺和内毒素所致小鼠急性肝损伤保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、大豆皂昔对D—半乳糖胺和内毒素所致小鼠急性肝损伤保护作用［摘要］目的：研究大豆皂昔对D-半乳糖胺（GalN）及内毒素（LPS）联合诱发的急性肝损伤的保护作用。方法:将实验小鼠按体重随机分为5组，即正常组、模型组、阳性对照水飞蓟素组（0.10mmol•kg-1）及大豆皂昔高、低剂量组（0.24,0.12mmol・kg-l）o每日给药1次，连续7d0实验末期，除正常组外，其余组小鼠腹腔注射GalN和LPS建立急性肝损伤模型，苏木素-伊红（HE）染色法观察肝组织病理学变化，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子
2、-a（TNF-a）,比色法检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）以及肝脏过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽-S-转移酶（GST）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量和Caspase-3,Caspase-8活化水平。结果：大豆皂昔明显降低GalN和LPS联合诱导的急性肝损伤小鼠血清ALT,AST活性，减轻肝组织病理损伤，降低血清TNF-a水平，降低肝N0和MDA水平,升高肝组织CAT,GPx,GST活性和GSH水平，降低肝组织Ca
3、spase-3和Caspase-8活化水平。结论：大豆皂昔对GalN和LPS联合诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用，其机制可能与其抗氧化活性和抗肝细胞凋亡作用有关。［关键词］大豆皂昔；肝损伤；抗氧化；凋亡流行病学调查证实，常食大豆有助于预防癌症和心血管疾病的发生，而这些均与大豆中的异黄酮和皂昔等活性物质密切相关。大豆皂昔是存在于大豆中的一类五环三菇的糖昔，主要分为A类、B类、E类和DDMP皂昔［1］。具有抗氧化、抗癌、防治心血管疾病及免疫增强等多种药理作用［2-3］o研究还表明，大豆皂昔对酒精性肝损伤
4、以及半刀豆球蛋白A所致免疫性肝损伤具有保护作用［4-5］o本实验通过建立D-半乳糖胺（GalN）及内毒素（LPS）联合诱导的小鼠急性肝损伤模型，观察大豆皂昔对小鼠急性肝损伤的保护作用，为大豆皂昔的开发利用提供科学依据。1材料1.1动物昆明小鼠，雄性，体重18〜22g,由延边大学实验动物中心提供。1.2药物和试剂大豆皂昔（纯度280%）购于华北制药股份有限公司；GalN及LPS购于Sigma公司；水飞蓟素购于沈阳东陵药业股份有限公司；谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、过氧化氢酶（CAT）、谷
5、胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽-S-转移酶（GST）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（N0）及蛋白试剂盒购于南京建成科技有限公司；TNF-aELISA试剂盒购于武汉博士德公司。1.3仪器3-30K型离心机（德国Sigma公司）；S22PC型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；RT-2100型酶标仪（深圳雷杜公司）；ZMN-7803型组织包埋机（常州市华利电子有限责任公司）；RM2126型切片机（上海探卡仪器有限公司）；BA200型生物显微镜（中国麦克奥迪实业集团有限公
6、司）。2方法1.1动物分组及处理将50只小鼠按体重随机分为5组，即正常组、模型组、水飞蓟素组（0.10nnnol・kg-l）、大豆皂昔高、低剂量组（0.24,0.12mmol•kg-l）0每日灌胃给药1次，连续7d,正常组及模型组小鼠则以等体积生理盐水灌胃。末次给药1h后，除正常组腹腔注射无菌生理盐水外，其余各组小鼠腹腔注射给予2.26mmol•kg-1GalN和10Pg・kg-1LPS（用无菌生理盐水配制）。造模期间禁食，不禁水。2.2血清转氨酶及TNF-a水平的检测造模1.5h后，分离血清，检测
7、小鼠血清TNF-a。造模8h后，分离血清，检测小鼠血清ALT,AST活性，并按公式计算药物对TNF-a及转氨酶活性的抑制率。抑制率二（模型组-治疗组）/（模型组-正常组）X100%2.3肝组织病理学检查造模8h后处死动物，取小鼠肝左叶，固定于10%福尔马林溶液中，常规石蜡包埋、切片、HE染色，在光镜下观察肝组织病理学变化。2.4肝组织氧化应激、抗氧化活力及凋亡相关指标的检测4°C裂解肝细胞，离心取上清。按照各测试盒操作方法测定CAT,GPx,GST,GSH,MDA,NO水平以及肝细胞Caspase-
8、3和Caspase-8活性的相对活化程度。2.5统计学处理数据以±s表示，组间均数比较采用SPSS11.5统计软件，进行单因素方差分析和Turkey?s多因素t检验。3结果1.1大豆皂昔对急性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的影响与正常组比较，模型组小鼠血清ALT和AST活性明显升高(P3.3大豆皂昔对急性肝损伤小鼠血清TNF-a以及肝NO水平的影响与正常组比较，模型组小鼠血清TNF-a和肝NO水平明显升高(P[7]邓秀兰，钟相根,张晓晶，等.痰热清注射液对小鼠免疫性
