番茄抗枯萎病i-2基因的snp分子标记及种质资源的筛选

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1、东北农业大学农学硕士学位论文3．6．3TheEfiectofconcentrationofdNTPonPCRamplification⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．283．7ObtainofTheSNPMarkerandScreenofTomatoGermplasmResource⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．293．7．1SepermionandPurificationof凡“ariumWilt⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．293．7．2Seeding．inoculationIdentificationofTomatos’ResistancetoF搬ariumWilt⋯⋯⋯⋯⋯．

2、304Diseussion．⋯．．．⋯．．．．．．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯．．⋯．⋯．⋯．．．⋯⋯．．⋯．⋯．．⋯．．．⋯．．．⋯．．．．．．⋯．．．．．．⋯．⋯．⋯．．．．314．1InoculationIdentificationofTomatos’ResistancetO，如ariumWilt⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．314．2ExtrmionofTotalGenomicDNA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯314．3FactorsThatA髓ctTheAllele．specificPCR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．314．3

3、．1ConcentrationofMgCl2anddNTP⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯324．3．2TheEfirectofTheMismatchedBasesofTheAllele．SpecificPrimersonPCR．⋯⋯⋯⋯．．324．4DetectionSNPGenotype．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．．．⋯⋯．．．．⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯．．324．5MolecularMarkersofResistanceGenes．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．325Conclusion⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、．．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯．．．．⋯⋯．．．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯．⋯．34Acknowledgement⋯．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．⋯．．．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．．35References⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．36Appendix⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯．．．．．⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．41AppendixA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41AppendixB⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．．．⋯⋯．．．．⋯⋯．．．．．．⋯．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42Publishedarticleduringspecializingthedegreeofmaster⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．44前言1前言1．1研究目的与意义、研究内容、实验技术路线1．1．1研究的目的与意义番茄(Lycopersicon．escullenturnMill)原产于南美西部高原地带，是茄科(solanaceae)番茄属(1ycopersicon)的一年生或多年生植物。在世界各国种植

6、广泛的蔬菜作物之一，有较强的适应性，被列为全世界产量最高的30种农作物之一。我国的番茄栽培面积位居亚洲首位，每年都稳定在1lO万公顷左右。随着番茄保护地栽培面积的扩大，保护地特殊的环境使得番茄病害日益严重，其中番茄枯萎病是生产中最严重的病害之一，是一种世界性的病害。这一病害在五十年代在我国并不普遍发生，因而危害不大。但近十几年随着大棚种植番茄面积的迅速扩大，靠土壤传染的菌量逐年累积，番茄枯萎病的发生日趋严重。程爱昀IlJ于1999年对山东地区棚栽番茄枯萎病进行调查，得出番茄枯萎病的一般发病率为20"～30％，严重可达80～90％，甚至全部毁灭，严重影响番茄的产量。而防御番茄枯萎病的最有效方

7、法就是培育抗枯萎病的番茄品种。通过传统的人工接种对番茄抗病性鉴定，不仅需要较长的时间和花费较大的人力物力，对多抗性种质改良和新品种的选育进度造成影响，而且还容易受到温度、湿度、光照等外界环境条件，接种技术等影响，容易导致结果的不稳定。因此培育优良的抗枯萎病的番茄品种是解决番茄病害问题的有效途径。自20世纪50年代发现番茄枯萎病，现已遍及世界。根据国内外的研究报道，番茄枯萎病菌的生理小种主要有三个：生理小种1、生理小种2和