高产木聚糖酶菌株的选育 毕业论文

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1、毕业设计(论文)题目高产木聚糖酶菌株的选育姓名学号0910511238所在学院轻工学部专业班级2009级生物工程2班指导教师日期2013年6月6日摘要本课题以自制木聚糖样品为唯一碳源,透明圈平板筛选法初筛,摇瓶发酵复筛,从土壤中筛选出五株产木聚糖酶的菌株,其中株菌Q2酶活最高,其酶活为5.858IU/ml。以Q2菌株为出发菌株,酶活力为评价指标,采用单因素的方法对培养条件进行优化,得出最优培养条件为:温度37℃,接种量为6%,种龄16h,初始pH值8.0。然后以Q2菌株为出发菌株,进行紫外诱变,透明圈平板筛选法初筛,摇瓶发酵复筛,获

2、得突变株T3,酶活达7.54IU/mL,较出发菌株Q2提高了1.32倍。经遗传稳定性试验,该性状具有一定的遗传稳定性。关键词:菌种筛选,木聚糖酶,酶活力,紫外诱变6AbstractThetopicstosamplehomemadexylanassolecarbonsource,transparentcircleplatescreeningscreening,rescreeningfermentation,screenedfromsoilxylanasefivestrains,includingstrainsQ2highestacti

3、vity,itsenzymaticactivityforthe5.858IU/ml.Q2strainwasstartingtostrain,activityindicatorsfortheevaluation,theuseofsingle-factorapproachtocultureconditionswereoptimized,andtheoptimalcultureconditions:temperature37℃,inoculationof6%,seedage16h,initialpH8.0.ThenQ2strainasth

4、estartingstrainbyUVmutagenesis,transparentcircleplatescreeningscreening,rescreeningfermentationobtainedmutantT3,activityreached7.54IU/mL,comparedwiththestartingstrainQ2increased1.32times.Warpgeneticstabilitytest,thetraithasacertaingeneticstability.Keywords:strainselect

5、ion,thexylanaseenzyme,enzymeactivity,IUVmIUtagenesis6目录摘要IABSTRACTII1前言11.1木聚糖及木聚糖酶的简介11.1.1木聚糖的结构及其木聚糖酶的分类11.1.2木聚糖酶的分子结构11.1.3木聚糖酶的理化性质11.1.4木聚糖酶的催化机制21.2木聚糖酶的产生与测定方法21.2.1产木聚糖酶的菌株21.2.2产木聚糖酶菌株的筛选方法21.2.3木聚糖酶酶活的测定方法31.2.4木聚糖酶的生产及其影响因素31.3木聚糖酶的应用41.3.1木聚糖酶在造纸工业中的应用41.

6、3.2木聚糖酶在酿造、饲料工业中的应用41.3.3木聚糖酶在食品工业中的应用51.4本课题的研究意义及主要研究内容51.5课题的主要研究内容与目录51.5.1研究内容51.5.2研究目标52材料与方法72.1实验材料72.1.1分离样品72.1.2试剂配制72.1.3培养基72.2主要仪器及设备862.3主要试剂82.4实验方法92.4.1木聚糖的制备92.4.2木聚糖酶活测定92.5实验步骤102.5.1菌种的分离筛选102.5.2生长曲线的绘制112.5.3致死曲线的绘制112.5.4紫外诱变后初筛112.5.5诱变后摇瓶复筛1

7、22.5.6遗传稳定性试验123结果与分析133.1菌株分离筛选结果133.1.1初筛结果133.1.2摇瓶复筛结果133.2菌株Q2生长曲线的绘制143.3菌株Q2最佳培养条件的优化153.3.1接种量对菌株Q2产酶的影响153.3.2初始pH对菌株Q2产酶的影响163.3.3温度对菌株Q2产酶的影响163.4致死曲线的绘制173.5诱变后初筛结果183.6诱变后复筛结果193.7遗传稳定性结果193.5结论194致谢215参考文献2261前言1.1木聚糖及木聚糖酶的简介1.1.1木聚糖的结构及其木聚糖酶的分类木聚糖是属于植物半纤

8、维素的一种,是自然界中丰富的多糖之一,也是自然界中丰富的可再生资源。木聚糖是由D-木糖主链(以β-1,4键相连)和L-阿拉伯糖分枝(α-1,2和 α-1,3相连)所组成的聚合物,由于它是由阿拉伯糖和木糖两种单糖聚合而成,因此也称阿拉伯

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