ω3多不饱和脂肪酸对人外周血树突状细胞的影响

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1、∞．3多不饱和脂肪酸对人外周血树突状细胞的影响摘要目的：(o．3多不饱和脂肪酸(∞一3polyunsaturatedf．a蚵aCids，∞一3PUFAs)是营养免疫中小分子物质的重要组成部分，其主要成分包括二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。树突状细胞(Dendriticcells，DCs)具有激活免疫排斥和诱导免疫耐受的双重潜力，两者此消彼长。经DCs诱导耐受是延长移植物存活的有效方法。本研究通过人外周血单个核细胞来源的树突状细胞的体外培养，对DCs进行形态学观察、细胞因子及免疫表型的检测，探讨(o．3多不饱和脂肪酸对树突状细胞成熟状态

2、及免疫学功能的影响。方法：取新鲜健康成人外周血，经淋巴细胞分离液梯度分离，取中间白膜层细胞，通过贴壁处理，获得单个核细胞，加入含10％胎牛血清的RPMI1640完全培养基、人重组集落刺激因子(rhGM．CSF)、人重组白细胞介素．4(rhIL．4)，使其终浓度为：rhGM．CSF500U／h1，rhIL．4250U／／ml，隔日半量换液，诱导5天，获得未成熟树突状细胞(immamreDC，imDC)，然后以(o．3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)，二十二碳六烯酸(DHA)或饱和脂肪酸硬脂酸(SA)处理细胞24h，并将其分为5组：未成熟DCs组、成熟

3、DCs组、EPA处理组、DHA处理组和SA处理组。内毒素脂多糖(LPS)诱导细胞成熟后，细胞爬片Wright．Giemsa染色观察各组树突状细胞形态；采用半定量反转录聚合酶链式反应(R．T-PCR)检测树突状细胞共刺激分子CD80mRNA、CD86mRNA及表面抗原提呈分子人类白细胞抗原．DR(HLA．DR)mRNA的表达；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清中白细胞介素．12(IL．12)及肿瘤坏死因子．Q(TNF．Q)的含量。结果：未成熟DCs组CD80mRNA、CD86mRNA及HLA．DRmRNA的相对表达量为O．369±O．0

4、23、0．573±O．033及O．467±O．020，成熟DCs组这3种分子高表达，其相对表达量为O．767±O．017、1．160±O．047及O．80l±0．016，成熟DCs组与未成熟DCs组之间相比，有显著性差异(P

5、A和DHA处理组与成熟DCs组相比有统计学意义(PO．05)。细胞上清IL．12的含量，5个组分别为190．73±16．26、768．05±62．73、358．71±52．79、412．63±62．64、709．48±47．81pg／ml，细胞上清TNF．Q的含量，5个组分别为637．61±38．40、2405．73±125．48、1605．64±1

6、38．39、l807．38±140．34、2353．34±194．74pg／ml，EPA及DHA处理组与成熟DCs组相比差异有统计学意义(P0．05)。结论：∞．3多不饱和脂肪酸可以在体外下调树突状细胞共刺激分子CD80、CD86及表面抗原提呈分子HLA．DR的表达，降低其细胞因子白细胞介素．12及肿瘤坏死因子．Q的释放，减弱树突状细胞的抗原提呈能力，且对树突状细胞的体外成熟有抑制作用，从而增强免疫耐受性，提示∞一3多不饱和脂肪酸可能减轻器官移植中的排斥反应。关键词：树突状细胞；细胞因子；二

7、十碳五烯酸；二十二碳六烯酸2、Effectof(o-3polyunsaturatedI．at够acidsondendriticceIlsfromhumanperipheralbIoodAbstract：Objective：∞一3polyunsaturatedf．a蚵acids((o一3PUFAs)isasmallmoleculewhichisanimportantpartofitsmaincomponentsmlmmunenutrition，includingeicosapentaenoicacid(EPA)anddocosdhexaenoicacid

8、(DHA)．Dendriticcells(DCs)canactivateimmunerejec