叶酸—壳聚糖磁性纳米颗粒的制备与体外实验研究论文

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1、原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：望立日期：上!f兰年』月尘曰学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学

2、位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。日期：竺堕年』月』日硕士学位论文中文摘要摘要目的：制备叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒并对制备方法进行优化，通过体外实验评价叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒对叶酸受体高表达的人乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性及MCF-7细胞对其摄取，探索叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒的肿瘤靶向性。方法：叶酸受体靶向的磁性纳米颗粒的制备分三步进行，首先使用共沉淀法合成磁性纳米颗粒，

3、再依次用壳聚糖和叶酸对磁性纳米颗粒表面进行共价修饰。通过MTT法分别测定不同浓度磁性纳米颗粒、壳聚糖磁性纳米颗粒以及叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒作用下叶酸受体高表达的人乳腺癌细胞MCF-7细胞的细胞生长率。用异硫氰酸荧光素(FITC)分别标记叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒和壳聚糖磁性纳米颗粒，与MCF-7细胞共培养数小时后，用激光共聚焦荧光显微镜观察MCF一7细胞中两种荧光标记颗粒的表达。结果：合成了粒径在lOnm以下的磁性纳米颗粒，终产物叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒平均粒径为45．12nm．分散性好，稳定性好。MTT实验结果

4、表明叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒作用下的MCF一7细胞的细胞生长率明显高于磁性纳米颗粒，但稍低于壳聚糖磁性纳米颗粒。激光共聚焦荧光显微镜观察结果表明MCF-7细胞对叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒的摄取明显高于对壳聚糖磁性纳米颗粒的摄取。结论：制备的叶酸一壳聚糖磁性纳米颗粒符合肿瘤靶向给药的基本要求，具有较低的细胞毒性和较高的MCF一7细胞主动靶向性。关键词：磁性纳米颗粒，叶酸，叶酸受体，肿瘤靶向性硕士学位论文英文摘要AbstractObjective：Topreparefolatechitosanmagneticnanop

5、articlesandoptimizethepreparationmethod．Toevaluatethetoxicityoffolatechitosanmagneticnanoparticlesinhumanbreastcancercells(MCF一7)，inwhichfolatereceptorshighlyexpress，andtheuptakenbyMCF一7basedonvitroexperiments，andtoexplorethetumortargetingoffolatechitosanmagn

6、eticnanoparticles．Methods：Firstly，themagneticnanoparticlesweres>7nthesizedbycoprecipitationandthesurfaceofmagneticnanoparticlesmodifiedwithchitosanandfolate．Secondly，thecellgrowthrateofMCF一7wasdetectedthroughtheMTTmethodbymagneticnanoparticles，chitosanmagneti

7、cnanoparticlesandfolatechitosanmagneticnanoparticles．Then，FITCwasusedtomarkthechitosanmagneticnanoparticlesandfolatechitosanmagneticnanoparticlesandcultivatedwithMCF一7afewhourslater．Finally，theexpressionoftWOmarkedparticleinMCF一7cellwithfluorescencemicroscope

8、wasobserved．Results：Theparticlesizeofmagneticnanoparticleswasunder10nm．Andtheaverageparticlesizeoffolatechitosanmagneticnanoparticleswas45．12nm．TheparticlesweregooddispersionandstableSOth