壳聚糖衍生物的制备与生物活性研究

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1、Author’Ssignature：巫：k。2k五：一‘●‘叁iupervisor7Ssignature：广上叫M幻Thesisreviewer1：隐名证闼Thesisreviewer2：隐名证阊Thesisreviewer3：隆名证阊Thesisreviewer4．Thesisreviewer5：Chair：．．．．．．．．．．．．Chenjizhong(professor,Zhejianguniversity)．．(Committeeoforaldefence)Committeeman1：M曼i!曼h星(p!Q鱼墨璺QL圣h自i堑g坠坠iY曼!墨i鲤)Committeeman2．Yaos

2、hanjing(professor,Zhejianguniversity)一Committeeman3．Guanyixin(professor,Zhejianguniversity)一Committeeman4．Committeeman5：Dateoforaldefenee：2012．3．7浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作

3、了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：1赵菜籽签字日期：oo，L年；月P／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝鎏盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：越东杀≯导师签名：签字日期：3勺Jz年琴月}1日签字日期：bl乙竽乡月f7日浙江大学硕士论文摘要壳聚糖(ehitosan)是自然界少见的天然带正电荷高分子聚合物，它不仅来源丰富、价格低廉、无毒、无刺激性

4、、无免疫原性、无致突变性而且可自然降解、良好的组织相容性、良好的缓释作用等特点，因而在农业、医药、食品、轻工业及环境保护等方面具有广泛应用。本文选择了自然界中存在较少的D．甲壳素为研究对象，并以此为原料，采用浓碱、高温、超声波辅助条件制备了脱乙酰度为90％的壳聚糖，主要反应条件为：50％NaOH，温度为80℃，固液比1：10，反应时间2h，超声波频率为25kHZ。以自制的壳聚糖为原料，制备出羧甲基壳聚糖及低分子量可溶性壳寡糖两种衍生物，并对上述两种壳聚糖衍生物的抗氧化活性及胆酸结合能力进行测定。采用酸碱滴定法测定羧甲基壳聚糖取代度，采用粘度法测定壳聚糖及壳寡糖的平均分子量，以红外光谱分析样品

5、的结构。首先，研究了氢氧化钠用量、氯乙酸用量、反应温度和反应时间对羧甲基壳聚糖取代度的影响。结果表明，氢氧化钠的用量对产物取代度的影响显著，其次是氯乙酸用量，反应温度和反应时间影响相对较小。最佳反应条件为：1．5g壳聚糖加入5mL50％NaOH溶液，4．5g氯乙酸，反应温度为60。C及反应时间为4h时，产物取代度最大可达到1．59。与传统制备方法相比，以鱿鱼软骨壳聚糖为原料，能较大幅度提高产物的取代度，且产物水溶性较好。其次，考察双氧水浓度、反应温度和反应时间对低分子量可溶性壳寡糖产率的影响。对影响低分子量壳寡糖产率的因素研究表明，反应温度对产物的产率影响最大，其次是反应时间，双氧水浓度对产

6、物产率影响最小。最佳反应条件为：9％双氧水溶液，反应时间5h，反应温度为65。C时，产物水溶性壳寡糖产率达到最大值78％。第三，对羧甲基壳聚糖的抗氧化活性及胆酸结合能力进行了研究。结果表明，与原料壳聚糖相比，羧甲基壳聚糖具有较高的清除DPPH自由基、清除羟自由基、清除超氧自由基、还原力、络合Fe2+的能力及胆酸结合能力。经羧甲基化后，壳聚糖分子内氢键降低，活性氨基及羟基增多，生物活性提高。第四，对可溶性壳寡糖的抗氧化活性及胆酸结合能力的研究表明，可溶性壳浙江大学硕士论文摘要寡糖相对于原料壳聚糖具有较高的抗氧化能力及胆酸结合能力，且随着分子量降低，壳寡糖抗氧化活性及胆酸结合能力随之而提高。这表

7、明，壳聚糖经H202降解后，分子链断裂，分子结构变得疏松，反应活性更强。关键词：B一甲壳素，壳聚糖，羧甲基壳聚糖，可溶性壳寡糖，抗氧化活性，胆酸lI浙江大学硕士论文AbstractChitosanisnaturalcationicbio-polymerwhichexistsrareinnature．Chitosanpossessesmanybeneficiallyproperties，suchasabunda