犬白介素-21基因扩增、克隆和序列的分析

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3、矗r；黪纛目羁≈i5_5lr≮匡i国}ih；矗；；谭n茹kh《^ur爿嚣“玎z芝眷誓i¨争l目x!乎fi“℃i鳗“i噶ii}撙##$县H¨!!型氮删强藿ir毛“¨lo薹l蠹¨}辩}}q型霪笔墨§蔓耋妒；oj}j{董，螬琶轴鲥#珏p譬藿蚕两#譬辑01ijj；誊iZ!iL￡墨目鑫w§霉豢妻善垂：重墓毫守iq吉林农业大学硕士学位论文犬白介素-21基因的克隆、测序与序列分析受体(IL21R)，随后从活化的人CD3+T细胞中成功克隆m白细胞介素21(imerleukine21，IL21)的基因。几21属于I类细胞因子家族(包括Ⅲ

4、2、IL4、IL7、IL9、IL15，它们的受体均含有vc链叶，1L21在氨基酸水平上与IL2、IL4、Ⅲ15有较高的同源性。IIJ2lR在氨基酸水平上与TL2R，IL4R有高度的一致性。皿2l主要由活化的CD。+T细胞分泌，与其受体结合后能够调节B细胞的增牛，促进T细胞、NK细胞的增殖、分化并能提高NK细胞杀伤活性。人IL2l基因定位于4q26一q27，与IL一2、TL—15在同一染色体上，距IL一2基因大约180kb，距lL—15则较远。Novak等报道人TI．一21cDNA(GenBank号：Al}254069)

5、共642个核苷酸，其中自42位至535位核苷酸为编码区。美国国立医学图书馆的注解组(NcBTAnnotationProject)报道的IL一2lcDNA(GenBank号：XM—oll082)为617位核苷酸，去除了最后25个核苷酸，其中第280位核苷酸为c，而Novak等“3报道的为T，但两者编码的蛋白质并无区别，皆为cys。鼠IL～2l(GenBank号：AF254070)定位于3号染色体上，共有307l碱基对，其中第54至494为编码区。canjneIL一21基因的读码框位于RNA序列的第75个核苷酸至第515个

6、核苷酸之问，共计441个核苷酸，共编码146个氨基酸残基。Genbank上虽然已上传了犬IL一2l的cDNA序列，但是其作者并未公开发表关于canineIL一21序列的任何文章。人与鼠的儿一2l相对来说，研究的比较深入，但由于犬与人的IL一2l具有较高的同源性，推测这两种白介素21具有许多相同的特性。人类的历史是不断向前发展的，尽管犬的IL一21的研究才刚刚起步，但笔者坚信其许多生物学特性将会不断被发现并公布于众。Novak等用Northern法在正常组织中并未检测到IL一21的表达，在PMA(prorb()112一m

7、yristate13一acetato，乙酰肉豆寇佛波酯)加上jonomycin(伊诺霉素)活化的外周T细胞中可测得IL一2lmRNA的表达。在，系列对cD。+T细胞的刺激实验"x吉林农业大学硕士学位论文犬白介素_2l基固的克隆、测序与序列分析IFN—Y或IL一4等细胞因子。4’2⋯。研究还证实IL一2l可以抑制初始T细胞向Thl细胞分化，并能抑制其合成lI刊等细胞凶子。这种作用在其他Th细胞因子不存在的情况下更明显。体内外实验表明IL一2l优先表达于Th2细胞，从而促进Th2细胞效应06’”1。53对祖淋巴细胞的影响I

8、L一21与IL—15协同刺激祖淋巴细胞增生、分化，这种协同作用大约是干细胞生长因子和IL—15作用的2倍“1”1。54对杀伤细胞的影响IL一21可以诱导NK细胞和LAK细胞等多种杀伤细胞的分化、增生和效应功能，并能诱导杀伤细胞产生IFN等多种细胞因子”“”’”1。IL一2l与IL—15可以协同刺激NK细胞合成TFN—Y、IL一12RB2年口IL—18R。“。IL一2l可以在F1t3L年口IL—15的协同作用下在体外缺乏基质细胞的情况下刺激骨髓祖细胞增殖分化为CD。。’cD。+NK细胞。IL一2l还可以作用于成熟的NI(

9、细胞，增强其杀伤靶细胞的细胞毒活性。Kasaian等。”研究发现TI。一2l能增强NK细胞的杀伤活性并能促进其合成IFN—Y，但不能维持其存活及活化。但IL一2l可以增强并能维持cD。+T细胞合成IFN—v的能力，提示IL一2l可能在促进机体免疫由固有性免疫应答向适应性免疫应答转变中发挥作用。55调节免疫球蛋白的产生IL一2l和l