知母菝葜皂苷元的分离纯化以及体外诱导肝癌细胞hepg2凋亡的研究

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1、知母薹荚皂苷元的分离纯化以及体外诱导肝癌细胞私膨碉亡的J开究硕士学位论文⑦摘要本实验旨在从知母中分离制备高纯度的菝葜皂苷元，并研究和探讨菝葜皂苷元的潜在的生物学活性，尤其是菝葜皂苷元在抗肿瘤方面的作用。知母(AnemarrhenaasphodeloidesBunge)作为一种常用中药，现在越来越受到国内外研究者的重视，具有不错的发展潜力和市场前景。菝葜皂苷元(sarsasapogenin)是知母中一种主要活性成分，具有清热解毒，止渴除烦，润肺滋肾，抗病毒，抗血小板聚集，降血糖，清除自由基等生理作用。可以用来主治现代医学中烦热消渴，热性病高烧，肺热咳嗽，结核病发热，糖尿病，大便干燥，老

2、年性痴呆症及脑功能减退等症状。因此菝葜皂苷元具有广泛的应用前景。但是，目前关于菝葜皂苷元在抗肿瘤方面的研究报道甚少。实验包括两个部分，第一部分为菝葜皂苷元的分离纯化。我们首先通过乙醇回流浸提，D101大孔树脂(蒸馏水、10％氢氧化钠溶液、30％的乙醇水溶液、90％的乙醇水溶液)梯度洗脱、10％盐酸酸解、活性炭脱色和甲醇重结晶等方法从中药知母中提取菝葜皂苷元晶体，然后利用红外、质谱、核磁共振和高效液相色谱等化学方法鉴定其结构和纯度。实验的第二部分为菝葜皂苷元生物学活性的研究。我们将分离纯化而得的菝葜皂苷元作用于肝癌细胞HepG2，通过电泳、MTT、流式细胞、荧光染色和电镜等方法研究菝葜

3、皂苷元对肝癌细胞HepG2的凋亡影响。本研究发明的菝葜皂苷元分离提纯的方法具有分离速度快、分离成本低、得率高、纯度高(纯度>98％)、晶体规则(白色针晶)、原料丰富易得等特点；在生物活性实验中，发现菝葜皂苷元能明显抑制肝癌细胞HepG2的增殖，促进细胞凋亡，并且凋亡率的增加呈剂量和时间依赖性。关键词：知母；菝葜皂苷元；肝癌细胞HepG2；凋亡知母麓姜皂苷无畸分葛纯化以反体外诱导肝癌细胞獬碉亡的研究J埴士学位论文⑧AbstractInthisresearch，weisolatedsarsasapogeninfromAnemarrhenaasphodeloidesBungeandstud

4、ieditspotentialbiologicalactivity，especiallyitsanti-tumoreffects．TheAnemarrhenaasphodeloidesBungeisakindofincommonuseChineseherbalmedicine．ThesarsasapogeninisakindofmainlyeffectivecomponentsofAnemarrhenaasphodeloidesBunge．Ithastheeffecttocounteractpoison，preventthirstandlowerthebloodsugarlevel．

5、Italsoshowsaroleinvariousphysiologyfunctionssuchasanti-virusinfection，anti-plateletsaggregation，clearanceoffreeradicalsandSOon．Itcanbeusedtoeliminatethethirstinthevexedheat,hotsexuallytransmitteddiseaSeinducedhighfever，thetuberculosisinducedcoughanddiabetes．Italsoshowsapotentialabilitytotreatwi

6、thAlzheimersdiseaseandotherneuronregenerationdiseases．Therefore，thesarsasapogeninhaSanextensiveapplicationpossibilityintheclinicalmedicine．However，thereareafewreportsfocusedontheanti-tumoreffectsofsarsasapogenin．ThefirstpartoftheexperimentistheisolationandcharacterizationofsarsasapogeninfromAne

7、marrhenaasphodeloidesBunge．WeextractedsarsasapogeninfromAnemarrhenaasphodeloidesBungebyresin，acid-degradationanalysisandre-crystallizationmethods．ThenweanalyzedthechemicalstructureandpurityofsarsasapogeninbyInfraredSpectrum，MassSp