异菝葜皂苷元和梓醇调节bdnf表达的机制研究

《异菝葜皂苷元和梓醇调节bdnf表达的机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、上海交通大学博士学位论文异菝葜皂苷元和梓醇调节BDNF表达的机制研究指导教师学科专业研究方向申请学位学号培养单位张瑞01071090422013年5月基金资助：国家自然科学基金(No．30873056)；科技部综合性新药研究开发技术大平台(NO．2009ZX09301—007)。上海交通大学博士学位论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已

2、在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：药勺日期：扣f弓年歹月弓日上海交通大学博士学位论文上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全，解学校有关保留、便用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密囱。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名：弼％指导

3、教师签名：日期：2pI；年歹月3日日期：a口I3年与7月3日上海交通大学博士学位论文异菝葜皂苷元和梓醇调节BDNF表达的机制研究摘要阿尔茨海默症(Alzheimer’Sdisease，AD)是一种以记忆减退以及认知功能障碍为主要临床特征的神经退行性疾病。脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor，BDNF)能调节突触可塑性，在神经元的生长，分化中发挥重要功能。促进BDNF的表达是AD药物开发的一个重要方向。滋阴中药的活性成分异菝葜皂苷元(sIIlilageIliIl，SMI)和梓醇都能通过促进BDNF

4、的生成而发挥神经保护功能。本文就SMI和梓醇调节BDNF表达的机制展开探讨。我们以全反式维甲酸诱导分化的神经母细胞瘤细胞SH．SY5Y为研究对象，研究SMI对p．淀粉样肽(13-amyloid，Ap)损伤细胞的作用。首先我们确认了SMI能提高AD损伤细胞的存活率，以及显著促进BDNF的蛋白和mRNA表达的作用。接下来，对BDNF的转录速率和降解率的测定表明，SMI能促进Ap损伤SH．SY5Y细胞BDNF的新生转录，但对其降解无显著影响。进一步对BDNFmRNA各转录子的测定结果显示，SMI主要促进包含外显子IV和VI的BDNF转录子表达。考

5、虑到cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein，CI也B)是调节转录子IV和VI表达的关键转录因子，我们对CREB和其活化形式磷酸化CREB(pCREB)的表达进行测定，结果显示，SMI能上调AIS损伤SH．SY5Y细胞pCREB的含量。如用RNA干扰的方法阻断CREB的表达，则SMI促进BDNFmRNA和BDNF转录子IV和VI表达的作用完全消失。对促进CREB磷酸化的信号分子研究发现，SMI能促进AD损伤SH．SY5Y细胞的细胞外信号调节激酶(extracellularsignal—re

6、gulatedkinase，ERK)1／2磷酸化水平的升高，如用U0126阻断ERKl／2磷酸化，则SMI促进pCREB水平升高的作用完全消失。IV上海交通大学博士学位论文最后，我们对梓醇影响BDNF表达的机制展开研究。我们观察到梓醇显著提高A13损伤SH．SY5Y细胞的存活率，促进BDNF的蛋白和mR_NA表达。通过对BDNFmRNA转录子的测定，我们发现和SMI略有不同，梓醇主要促进的是转录子IV的表达，对转录子I、II和VI的表达没有显著影响。梓醇也能提高pCREB的含量，如用CREBsiRNA阻断CREB表达，则梓醇促进AD损伤SH

7、—SY5Y细胞BDNFmRNA表达的作用部分消失。综上所述，SMI和梓醇均能促进AI]损伤神经细胞BDNF蛋白、mRNA和转录子IV的表达，促进CREB的磷酸化。我们的研究结果也提示，SMI主要通过ERK／CREB通路促进BDNF的新生转录；而对梓醇的机制研究发现，CREB可能部分参与了梓醇上调BDNFmRNA表达的作用。关键词：异菝葜皂苷元，梓醇，阿尔茨海默症，脑源性神经营养因子，cAMP反应元件结合蛋白，细胞外信号调节激酶1／2V上海交通大学博士学位论文Mechanisticstudyontheregulatoryeffectofsmi

8、lageninandcatalpolonBDNFexpressionAbstractAlzheimer’Sdisease(An)isaneurodegenerativedisea