avastin全身用药对大鼠视网膜新生血管的抑制作用

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1、山西医科大学硕士学位论文2．3尾静脉注射方法：用10％水合氯醛溶液(6ml／kg)腹腔内注射麻醉幼鼠后，将其固定到鼠板上，用酒精棉球擦拭鼠尾巴，可见到两侧静脉，选取一侧静脉从尾尖端开始顺血管方向刺入，回抽有血后，把鼠尾和针头一起固定好，不要晃动，缓慢推注。注射完拔出针头后，压迫片刻以止血。2．4视网膜铺片的制作：用10％水合氯醛溶液(6ml／kg)腹腔内注射麻醉幼鼠后，立即打开胸腔，暴露心脏，心腔穿刺并于心腔内注射墨汁2ml，然后取出鼠眼，置于4％多聚甲醛溶液中4。C固定24小时后，沿角膜缘剪开眼球，去除晶状体、玻

2、璃体，剥下视网膜，以视盘为中心作4个放射状切开，铺于载玻片上，树脂明胶封片，在光学显微镜下观察视网膜血管形态学变化。2．5视网膜组织切片的制作及观察：用10％水合氯醛溶液(6ml／kg)腹腔麻醉，心腔灌注10％中性甲醛固定液内固定。内固定完毕后，迅速取出右眼浸入10％中性甲醛固定液中固定48小时，常规脱水透明，石蜡包埋。切片方向平行于角膜至视盘的矢状位连续6um切片，每只眼球取15张切片，相邻2张切片间隔30txm，HE染色，显微镜下观察结果。用双盲法计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数，统计平均每只眼球每张切片

3、突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数。选取切片时应避开视盘周围，计数血管内皮细胞核时仅计数与内界膜有联系的血管内皮细胞核，不包括玻璃体腔内其它与内界膜无联系的血管内皮细胞核。2．6肾脏组织切片的制作及观察t．用10％水合氯醛溶液(6ml／kg)腹腔麻醉，心腔灌注10％中性甲醛固定液内固定。在取出右眼后，再立即取出双肾浸入10％中性甲醛固定液中固定48小时，常规脱水透明，石蜡包埋。沿肾脏长轴切片，厚度为31xm，HE染色，光学显微镜下观察肾脏组织病理形态学变化。’3、统计学分析：应用SPSSl3．0软件行统计学分析，实

4、验数据均以；士s表示，空气对照组与高氧对照组之间比较、高氧对照组与高氧NS组之间比较用两样本t检验：高氧NS组、Avastin15．625mg／kg组、Avastin31．25mg／kg组、Avastin62．5mg／kg组之间的比较行组间方差分析，以P<0．05为具有统计学意义。1、视网膜血管形态学观察多士甲二日7K空气对照组墨汁灌注视网膜铺片(见图1)中可见视网膜血管自视盘发出，向四周呈放射状均匀分布，管径较粗，分支良好，周边视网膜血管网结构清晰。高氧对照组墨汁灌注视网膜铺片(见图2)中可见视网膜血管管径明显变

5、细，分支减少，有一粗大的新生血管自视乳头发出，伸入玻璃体腔，周边视网膜小血管灌注减少，甚至闭塞，可见墨汁渗漏。高氧NS组墨汁灌注视网膜铺片(见图3)中可见视网膜血管管径明显变细，分支减少，有一较为粗大的新生血管自视乳头发出，伸入玻璃体腔，周边视网膜小血管灌注减少，甚至闭塞，可见墨汁渗漏。Avastin15．625mg／kg组墨汁灌注视网膜铺片(见图4)中可见视网膜血管管径稍粗，分支仍然较少，伸入玻璃体腔的新生血管管径较细，周边视网膜可见灌注，有墨汁渗漏。Avastin31．25mg／kg组墨汁灌注视网膜铺片仍然可见

6、伸入玻璃体腔的新生血管，管径较细，周边网膜可见灌注。Avastin62．5mg／kg组墨汁灌注视网膜铺片(见图5)可见视网膜血管较粗，深入周边网膜，分支仍然较少，无新生血管伸入玻璃体腔。2、视网膜新生血管计数空气对照组视网膜新生血管较少，几乎未见突破内界膜的血管内皮细胞，平均每张切片中新生血管数为(1．774-0．97)(见图6)；高氧对照组、高氧NS组视网膜新生血管计数显著增多，可见大量突破内界膜的血管内皮细胞，平均每张切片中新生血管数分别为(29．40-J：2．49)和(28．67+1．99)(见图7、8)；A

7、vastin15．625mg／kg组、Avastin31．25mg／kg组、Avastin62．5mg／kg组突破内界膜的血管内皮细胞数目明显减少，平均每张切片中新生血管分别为(15．90-a：1．40)、(14．97+1．40)和(8．10-J：1．35)(见图9，图10，图11)。空气对照组和高氧对照组间比较差异具有统计学意义(P0．05)，Avastin15．625mg／kg组、Avastin31．25mg／kg组、Avastin62．5mg／k

8、g组三个组与高氧NS组间比较差异均具有统计学意义(P<0．01)，Avastin15．625mg／kg组、Avastin31．25mg／kg组、Avastin62．5mg／kg组三组间比较也具有统计学意义(除4组与5组之间比较P<0．05外，其余各组间比较P<0．01)。4表1视网膜新生血管数目比较(x4-s)l组与2组比较P<0．01，2组与3组比较P>0