发酵冬虫夏草胞外多糖的制备工艺研究

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1、万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝’江盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名嬲艘夕字日期：加3年)月跏学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿态堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。

2、本人授权逝望盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：彳亥霭7眨导师签名：签字日期：．≥一年3月狮签字日期．训弓／弓月“日}万方数据浙江大学硕士专业学位论文发酵冬虫夏草胞外多糖的制备工艺研究致谢本论文至始至终是在导师吴绵斌教授的悉心指导和热情关怀下完成的。两年多来，吴老师严谨求实的治学态度、开阔的视野、刻苦勤奋的工作作风以及平易近人的为人风格令我钦佩不已。从论文的选题、实验方案

3、的确定、实验工作的开展到论文的审阅，都倾注了吴老师大量的心血。在此，我谨向吴老表示最衷心的感谢和最诚挚的敬意!并衷心祝愿吴老师工作顺利，身体健康!同时感谢杭州中美华东制药有限公司高级工程师许静总监，在实验过程中帮助我解决实验中的难题，以及对我的论文提出的宝贵而诚挚的意见。感谢杭州中美华东制药有限公司101车间许峰主任在设备和材料采购等方面给予了的指导与帮助，使我能专心致力于课题的研究。感谢其他同事的帮助，使我能够顺利完成课题。万方数据浙江大学硕士专业学位论文发酵冬虫夏草胞外多糖的制备工艺研究摘要虫草多糖作为

4、冬虫夏草中重要的活性化合物，具有良好的药理作用。本论文的目标是以发酵冬虫夏草滤液作为起始原料，建立合适的提取工艺，从滤液中提取胞外多糖，为工业化奠定理论基础。论文建立了利用苯酚．硫酸法快速测定虫草多糖含量的方法，最大吸收波长为486nlil，线性范围为0．107gg／ml，线性方程为y=0．0105x--0．0133，92=0．9998，显色反应后生成的化合物在3h内稳定，该方法6次测定的吸光值的相对标准偏差为0．01％，重复性实验中测得的样品纯度的相对标准偏差为0．44％，6份检测样品的平均回收率为99．

5、26％。采用纳膜浓缩，乙醇沉淀法制备发酵冬虫夏草胞外粗多糖，以多糖收率和纯度为指标考察了各种提取条件对多糖提取的影响，结果表明最佳脱淀粉条件为滤液pH>5，中温0【．淀粉酶(酶活：3000U／g)用量／滤液体积=4¨l／L，反应温度：25。C，反应时间：40min，选用CTl51树脂，当多糖浓度2mg／ml，多糖／树J指(mg／g)=72：1，温度20℃，时间60min时，脱色和脱蛋白效果最佳。在上述条件下，进行了滤液多糖提取的中试实验，制备的多糖得率1．5g／L、纯度50％以上。采用DEAE琼脂糖凝胶色谱

6、对发酵冬虫夏草胞外多糖(EPS)进行组分分离，通过静态吸附和动态吸附研究，得到三个组分：EPSl：单一多糖组分；EPS2：色素和蛋白质杂质较少的多糖混合组分；EPS3：色素含量较高的多糖混合组分，经过分析其重均分子量分别为5642、21811和27371。关键词：发酵冬虫夏草，胞外多糖，提取纯化，DEAE琼脂糖凝胶色谱万方数据浙江大学硕士专业学位论文发酵冬虫夏草胞外多糖的制各工艺研究AbstractPolysaccharidesaceimportantactiveingredientsinCordyceps

7、sinensis，alsonamedDongChongXiaCao，whichisoneofthemostvaluablemedicinalfungiandhasbeenusedforover2000yearsintraditionalChinesemedicine．Inourstudy,aconvenientsystemofextractionandpurificationofpolysaccharidesfromfermentationCordycepssinensisfiltratehasbeenes

8、tablished．Andwealsostudiedthetheoreticalbasisforindustrialapplications．Firstly,basedontheclassicalphenol-sulphuricacidmethod，weestablishedtheanalyticalsystemofpolysaccharides．Itwasconcludedthatthecompoundcoul