巨噬细胞接触对肝星状细胞活化的研究

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1、巨噬细胞接触对肝星状细胞活化的研究计：学位论文：29页表格：2个插图：5幅黄施施指导教师：姜春萌教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：内科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：IIIIJIIIm

2、llllHillIllIIIIY2283278独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果

3、，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：童生丝盔鱼签字日期：址年上月2日关于学位论文使用授权的说明《巨噬细胞接触对肝星状细胞活化的研究》系本人在大连医科大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本，允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文加入：1．中国学术期刊

4、(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》及CNKI相关数据库。2．中国科学技术信息研究所——《中国学位论文全文数据库》3．国家图书馆本人授权大连医科大学，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文，可以公布论文的全部或部分内容。论文作者签名：亏施另色指导教师签名：≤垂翌垒鳗签字日期：翌趾年L月二日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)丑U舌⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、17三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29巨噬细胞接触对肝星状细胞活化的研究硕士生姓名：指导教师：专业名称：黄施施姜春萌教授内科学摘要目的：通过大鼠肝星状细胞与大鼠巨噬细胞问直接接触与非接触共培养，观察细胞间连接对大鼠肝星状细胞活化的影响。方法：1．分组：采用S-D大鼠，用原位胶原酶、蛋白酶序贯灌注法分散细

7、胞，再采用密度梯度离心法分离得到肝星状细胞(hepaticstellatecell，HSC)。用transwell培养系统实现非接触共培养。分组：A组：将大鼠肝星状细胞以O．5x105个／ml，lml接种于transwell培养系统的小室，将大鼠巨噬细胞以3．0x105个／ml，2ml接种于transwell培养系统的大室；B组：将大鼠肝星状细胞和大鼠巨噬细胞按A组的细胞数量比混匀后，分别于小室311ml，于大室]J12ml；，C组：将巨噬细胞以3．0x105个／ml，2ml接种于transwell六孔板的

8、大室中。D组：将大鼠肝星状细胞以0．5x10’个／ml，2ml接种于transwell培养系统的大室，将大鼠巨噬细胞以3．0x105个／ml，lml接种于transwell培养系统的小室：E组：将大鼠肝星状细胞和大鼠巨噬细胞按C组的细胞数量比混匀后，分别于小室加lml，于大室3H2ml；F组：将大鼠肝星状细胞以0．5×105个恤l，2ml接种于transwell培养系统的大室。2．观察指标：①HSCl拘ct一平滑肌肌动蛋白(ot-SMA)，用免疫细胞化学法。②细胞上清液中的I型胶原、转化生长因子一131(T

9、GF一131)、血小板衍化生长因子(PDGF)的分泌量，用酶联免疫吸附法(ELISA)。(D细胞的增殖情况，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法。3．统计方法：多个样本均数的比较采用one．wayA_NOVA，多个样本均数的两两比较采用LSD法检验，P<0．05为在统计学上有显著差异。结果：1．A、B、D、E、F组肝星状细胞的a一平滑肌肌动蛋白(0【一SMA)阳性表达。2．细胞上清液中的I型胶原：A组：36．364+1．