蓝萼甲素对人宫颈癌hela、siha细胞的作用及其机制研究

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3、细胞的作用及其相关分子机制。方法：人宫颈癌Hela、Siha细胞为模型，以不同浓度的GLA分别加入培养的Hela、Siha细胞中，各自培养不同时间后，用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的增殖活性；不同浓度的GLA加入Hela、Siha细胞培养48h后以流式细胞仪(PI单染和AnnexinV-FITC双染)检测其细胞凋亡率和细胞周期变化；瑞姬氏染色观察Hela、Siha细胞的形态学变化，透射电镜观察Hela、Siha细胞超微结构的改变；Westernblot检测Bax、Bcl一2、Caspase3、Caspase9、LC3、Beclinl蛋白表达。结果：(1)MTT检测结果显

4、示：不同浓度GLA作用Hela、Siha细胞不同时间后，细胞的抑制率逐渐增加(P<0．05)。提示GLA对Hela、Siha细胞的抑制作用呈时间．效应及剂量．效应依赖趋势；(2)瑞姬氏染色可观察到GLA给药组细胞变圆，随着GLA浓度的增加，细胞数量递减，细胞染色变深。(3)流式细胞仪PI单染结果显示：不同浓度GLA用于Hela、Siha细胞48h后，S期细胞所占比例逐渐增加(P

5、)；(5)AnnexinV-FITC双染结果显示：Hela、Siha细胞GLA+3一MA组凋亡率比3-MA凋亡率高(氏0．05)。(6)Westemblot检测结果：bax蛋白表达上调，bcl．2表达下调，Caspase3、Caspase9、LC3、Beclinl蛋白表达上调，且均呈剂量依赖趋势。结论：蓝萼甲素可抑制Hela、Siha细胞增殖，且呈剂量．效应依赖趋势，使细胞周期阻滞在S期，并可诱导Hela、Siha细胞凋亡，线粒体信号通路可能是其分子机制之一。I中文摘要蓝萼甲素对人宫颈癌Hela、Siha细胞的作用及其机制研究关键词：蓝萼甲素；Hela细胞；Siha细胞；毒性作

6、用；细胞增殖；细胞凋亡。lI作者t黄敬敬指导教师：王修珍副教授顾振纶教授蒋小岗副教授EffectsofGiaucocalyxinAoncervicalcarcinomaHela、SihacellanditsmechanismAbstractofGlaucocalyxinAoncervicalcarcinomaHela、SlhaeellanditsmechanismAbstract0bjective：ToinvestigatetheeffectsofGlaucocalyxinAoncervicalcarcinomaHela、Sihaeell，andthemolecularmech

7、anism．Methods：Cervicalcarcinomacell(Hela、Siha)weretreatedwithdifferentconcentrationsofGLA，afterdifferenttimesofGLAtreatment，thecellviabilitywasmeasuredbyMTTmethod．ApoptosisandcellcycleofHela、Sihacellafter48hofdifferentconcentrationsofGLAexposurewer