黄连碱体外抗炎作用及其机制研究

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1、学位论文指导教师姓名:孟左面熬援申请学位级别:亟±专业名称:药理堂论文提交时间:2Q12生垒旦论文答辩时间:2Q12生§旦二。一二年五月篓一成都中医药大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IIIAbstract..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯.⋯.⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯.⋯....⋯.⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯.⋯⋯...V前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一t实验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯.5第一部分:黄连抗炎药效物质基础研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯_⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一52实验方法及结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..73讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第二部分:黄连碱抗炎作用研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132实验方法及结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143{寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19第三部分:黄连碱抗炎机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222实验方法及结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243{寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..35参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.j⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..36文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55申明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57哪3删0删8一舢9~哪肿哪哪●-咖守~洲烈~洲Y~成都中医药大学硕士学位论文II成都中医

5、药大学硕士学位论文黄连碱体外抗炎作用及其机制研究中文摘要目的:观察黄连碱(Coptisine)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨赡细胞炎性细胞因子NO、n旺.a和IL.1B的作用以及对p-ERKl/2、IK]孰t和iNOS蛋白表达的影响,探讨黄连碱体外抗炎作用及其机制。方法:用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞,建立细胞炎症反应模型:(1)选择一氧化氮(NO)为指标,筛选黄连中五个主要成分的抗炎活性;(2)Am.Blue细胞增殖与活性检测试剂(SunBioⅢ)检测黄连碱对RAW264.7巨噬细胞增殖的影响;(3)Griess

6、法检测细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量;(4)ELISA法检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子.a(TNF.a)、白介素.1B(IL-1B)含量;(5)WesternBlot技术检测RAW264.7巨噬细胞P.ERKl/2、Ird3a和iNOS蛋白的表达。结果:(1)黄连五个主要成分中小檗碱、黄连碱和巴马汀都能明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的释放(p<0.05),并且小檗碱、黄连碱呈现出剂量依赖性;(2)黄连碱500M组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率明显高于空白对照组(p<0.05),但0.10M组、1pM组、l

7、OoM组、20ItM组和300M组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率没有明显的差异,和空白对照组相比(p>0.05);(3)黄连碱10I.tM组、301xM组NO释放量均明显低于LPS组(p<0.05),其释放量随着剂量的增加而减少,但10M组NO的释放量与LPS组比较无显著性差异(p>O.05),BAYll-7082组NO释放量明显低于LPS组(p

8、和IL.1B释放量明显低于LPS组(p

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